[发明专利]一种X连锁遗传性视网膜劈裂症的基因治疗方案与应用

说明书

本发明提供了一种X连锁遗传性视网膜劈裂症的基因治疗方案与应用。具体地，本发明对RS1基因编码序列进行了针对性特殊优化设计，从而获得了一种特别适合在哺乳动物(如人)细胞(如感光细胞、视神经细胞)中高效表达RS1蛋白的核苷酸序列，并构建了一种表达正常人源RS1蛋白的重组AAV病毒。相对于未优化的编码序列，经过特殊优化后的RS1编码序列(SEQ ID NO.:1)的表达量显著提高，非常适合在哺乳动物(尤其是人)细胞内表达，能有效治疗X连锁青少年视网膜劈裂症。

技术领域

本发明属于基因治疗领域，具体地，本发明涉及一种X连锁遗传性视网膜劈裂症(XLRS)的基因治疗方案与应用。

背景技术

X连锁视网膜劈裂症(X-Linked juvenile Retinoschisis，XLRS)是一种罕见的遗传性致盲性眼病,发病率约为1:5000～1:25000。XLRS主要累及双侧视网膜,在视网膜神经纤维层和神经节细胞层之间出现劈裂腔，导致严重的视力下降。此病常发于男性，是引起男性青少年黄斑变性的最主要原因,女性作为携带者无特征性临床表现。目前，临床上没有特异治疗XLRS青少年视网膜劈裂症的药物。

因此,本领域急需一种有效治疗XLRS同时安全可靠的治疗载体及组合物。

发明内容

本发明的目的是提供一种有效治疗XLRS同时安全可靠的治疗载体及组合物。

本发明的第一方面，提供了一种核苷酸序列，所述核苷酸序列编码人源RS1蛋白，且所述核苷酸序列选自下组：

(a)所述核苷酸序列如SEQ ID NO.:1所示；

(b)所述核苷酸序列与SEQ ID NO.:1所示的核苷酸序列有≥95％相同性，优选地≥98％，更优选地≥99％；和

(c)与(a)或(b)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。

在另一优选例中，所述核苷酸序列包括DNA序列、cDNA序列、或mRNA序列。

在另一优选例中，所述核苷酸序列包括单链序列和双链序列。

在另一优选例中，所述核苷酸序列包括与SEQ ID NO.:1完全互补的核苷酸序列。

在另一优选例中，所述核苷酸序列编码的氨基酸序列与人源RS1蛋白的氨基酸序列一致；优选地，所述的人源RS1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:2所示。

本发明的第二方面，提供了一种融合核酸，所述融合核酸包含如本发明第一方面所述的编码人源RS1蛋白的核苷酸序列。

在另一优选例中，所述融合核酸还包含UTR序列。

在另一优选例中，所述UTR序列包括3’UTR和/或5’UTR。

在另一优选例中，所述融合核酸从5’端-3’端具有式I结构：

Z0-Z1-Z2 (I)

式中，

各“-”独立地为键或核苷酸连接序列；

Z0为无、或5’UTR序列；

Z1为如本发明第一方面所述的核苷酸序列；和

Z2为无、或3’UTR序列。

在另一优选例中，所述融合核酸从5’-3’端的结构为5’UTR-人源RS1蛋白-3’UTR。

在另一优选例中，各个核苷酸连接序列的长度为1-30nt，较佳地1-15nt，更佳地3-6nt。

在另一优选例中，所述的核苷酸连接序列来源于限制性内切酶酶切形成的核苷酸接头序列。