[发明专利]一种评估抗结核药物治疗所致肝损伤风险的诊断试剂盒

说明书

本发明公开了一种评估抗结核药物治疗所致肝损伤风险的诊断试剂盒；所述试剂盒应用与抗结核药物治疗所致肝损伤风险相关的DNA甲基化生物标志物进行抗结核治疗肝损伤风险预测；所述标志物为位于NCX2基因上的CpG位点的甲基化水平，该CpG位点绝对位置为chr19:47447537‑47447538(GRCh38)。本发明提供了一种针对chr19:4744753‑47447538CpG位点DNA甲基化水平进行检测的核酸引物、检测方法及试剂盒；本发明提供的试剂盒能够有效评估抗结核药物治疗所致肝损伤的发病风险，促进抗结核精准用药的实现。

技术领域

本发明属于基因技术领域，涉及一种评估抗结核药物治疗所致肝损伤风险的诊断试剂盒；更具体涉及一种针对chr19:47447537-47447538(GRCh38)CpG位点DNA甲基化水平进行检测的核酸引物、检测方法及试剂盒。

背景技术

结核是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，主要感染肺部。抗结核治疗的一线治疗方案为异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇的联合用药，也是肺结核初治的标准化学治疗方案，可以对快速繁殖和半静止的结核杆菌进行同时杀伤，避免耐药性的产生。然而，抗结核药物治疗方案在人群中会引发不同程度的不良反应，涉及肝、肾、皮肤、胃肠道、血液、神经等多个组织器官。肝损伤是抗结核药物引发的最为常见、最严重的不良反应，我国抗结核治疗者中约15％～30％发生可逆性中度转氨酶升高，约2.55％～11.9％发生包括肝坏死在内的严重肝损伤，全球各国家地区报道的严重肝损伤发生率也在0.8％～40％不等。抗结核药物引起肝损伤的死亡率高达22.7％，在出现黄疸、腹水或肝性脑病时死亡率更高。此外，抗结核药物所致肝损伤引起的抗结核治疗中断或失败，也是诱发耐多药结核的重要原因之一。

药物性肝损伤是在按规定剂量正常应用药品的过程中产生的有害而非所期望的、与药品应用存在因果关系的肝脏不良反应，主要表现为肝细胞坏死、肝内胆汁淤积或上述二者的混合症状。根据生化检测指标，一般认为当血液中谷丙转氨酶超过5倍正常值上限，或碱性磷酸酶超过3倍正常值上限，或谷丙转氨酶超过3倍正常值上限且总胆红素超过2倍正常值上限时，诊断为发生严重药物肝损伤。但血液指标往往为肝损伤发生后的指示，并不能作为早期风险预测指标。

研究表明，抗结核药物治疗所致严重肝损伤有明显的个体差异，受到遗传因素的影响。同时，DNA甲基化可以影响60余种药物代谢酶的表达水平，但尚未有明确的DNA甲基化标志物可以对药物引起的肝损伤进行预测，因此开发更多的与抗结核治疗所致药物肝损伤分子标记物及风险预测试剂盒对患者实现个体化治疗是非常有必要的。

NCX2基因位于人类第19号染色体q13.32区段，编码Na⁺-Ca²⁺离子交换器，主要介导钙离子与钠离子在细胞膜上的电交换，从而有助于调节胞质钙离子水平和钙依赖性细胞过程，维持兴奋性细胞内Ca²⁺离子稳态，并有助于神经元激活后胞浆Ca²⁺水平迅速降低至基线水平，从而有助于调节突触可塑性、学习和记忆。在调节尿钙和尿钠排泄中起作用。对现有文献的检索，未发现有本发明的NCX2基因chr19:47447537-47447538CpG甲基化为抗结核治疗所致药物性肝损伤的分子标记物的相关报道。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明在NCX2基因chr19:47447537-47447538CpG的甲基化水平可以作为抗结核治疗所致药物性肝损伤风险预测的分子标记物的基础上，提供了一种评估抗结核药物治疗所致肝损伤风险的诊断试剂盒；更具体是提供一种分离待测位置核酸的核酸引物、检测方法、及其应用评估抗结核药物治疗所致肝损伤的发病风险的试剂盒。本发明提供的试剂盒能够有效评估抗结核药物治疗所致肝损伤的发病风险，促进抗结核精准用药的实现。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：