[发明专利]一种快速鉴别Ale和Lager型啤酒酵母的方法

权利要求书

1.一种鉴定Lager和/或Ale型啤酒酵母的方法，其特征在于，所述方法是以SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.4所示的引物对待筛选的啤酒酵母或其基因组DNA进行扩增，能够获得特异性片段的为Lager型啤酒酵母，不能获得特异性片段的为Ale型啤酒酵母；

所述Lager型啤酒酵母选自：啤酒酵母S23、啤酒酵母CA14、啤酒酵母W-34/70、啤酒酵母BF16、啤酒酵母CA30、啤酒酵母S189、啤酒酵母CA24、啤酒酵母CA25、啤酒酵母CA13、啤酒酵母CA21、啤酒酵母M76、啤酒酵母CA22、啤酒酵母Diamond、啤酒酵母CA36、啤酒酵母CA12或啤酒酵母US-05；所述Ale型啤酒酵母选自：啤酒酵母T-58、啤酒酵母WB-06、啤酒酵母M29、啤酒酵母Munich Classic、啤酒酵母WEISS、啤酒酵母BRY-97或啤酒酵母S33。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述特异性片段的核苷酸序列长度为757 bp。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述特异性片段的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。

4.根据权利要求1~3任一所述的方法，其特征在于，用于扩增的PCR反应条件为：95℃预变性3min；95℃变性15s，63℃退火15s，72℃延伸15s，共35个循环；72℃延伸5min，降温至4℃保存。

5.根据权利要求1~3任一所述的方法，其特征在于，所述PCR反应的反应体系含有2×Rapid Taq Master Mix、SEQ ID NO.3所示的引物、SEQ ID NO.4所示的引物、待测酵母DNA、ddH₂O，上述各组分的体积比为12.5:1:1:1:9.5。

6.根据权利要求1~3任一所述的方法，其特征在于，应用琼脂糖凝胶电泳检测扩增后的特应性片段，凝胶图谱显示含有特异性标记条带的为Lager型啤酒酵母，无特异性标记条带的为Ale型啤酒酵母。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，应用琼脂糖凝胶电泳检测扩增后的特应性片段，凝胶图谱显示含有特异性标记条带的为Lager型啤酒酵母，无特异性标记条带的为Ale型啤酒酵母。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，应用琼脂糖凝胶电泳检测扩增后的特应性片段，凝胶图谱显示含有特异性标记条带的为Lager型啤酒酵母，无特异性标记条带的为Ale型啤酒酵母。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，还对扩增后的特异性片段进行回收和测序。