[发明专利]腈水解酶启动子优化表达及应用

权利要求书

1.一种腈水解酶高效表达系统的构建，其特征在于所述方法为：将构建于商品化载体pET-T7-nit重组腈水解酶表达质粒进行启动子筛选和突变置换，所选置换启动子包含但不局限于trc、trp、tac、T5和lac系列启动子。

2.一种由权利要求1所述的方法在移除包涵体效应的应用，其特征在于所述的应用为：针对表达速率过快造成的包涵体问题，选取特定强度的启动子进行置换，调节基因转录速率，将启动子置换重组质粒转入感受态细胞构建重组工程菌，诱导表达后使重组蛋白有充足时间进行正确折叠，解除包涵体对菌体生长的抑制，增强重组腈水解酶可溶表达。

3.一种权利要求2所述的腈水解酶启动子置换重组菌在生物催化制备加巴喷丁中间体中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的应用为：以腈水解酶启动子置换重组菌或相应固定化重组菌为催化剂，在水或缓冲体系中催化1-氰基环己基乙腈区域选择性水解反应，制备1-氰基环己基乙酸，所述底物1-氰基环己基乙腈反应浓度为10-250g/L。