[发明专利]CTLA-4抗体及其制备方法

说明书

本文公开了CTLA‑4单克隆抗体以及该抗体的制备和用途，本发明CTLA‑4抗体具有毒性更低和活性更佳的优点；另外，本发明CTLA‑4抗体还具有低含量的高甘露糖糖型和/或低含量的唾液酸化糖型，有助于延长抗体的半衰期和/或降低免疫原性。

技术领域

本发明涉及一种CTLA-4单克隆抗体，其制备及应用。

背景技术

免疫系统是防止癌症发展和进展(progression)的重要防御手段。免疫疗法，如IL-2和自体肿瘤浸润淋巴细胞的过继转移，可以诱导患者亚组持续的肿瘤反应，从而使得预后不良的患者获得长期存活(Atkins MB，et al.(1999)，J Clin Oncol.17(7)：2105-2116)。随着对于抗肿瘤免疫的启动和效应阶段的重要性的进一步理解，基于检查点阻断的治疗方法最近开始为患者提供持久的益处，并似乎适用于广泛的恶性肿瘤。

免疫系统受到严格的调节，以响应适当的抗原，而不会对自身产生反应(Bretscher P，Cohn M.(1970)，Science.169(3950)：1042-1049)。T细胞是免疫反应的关键介质之一，需要共刺激才能激活，并且可以通过抑制信号使其失活(Sharpe AH，Abbas AK.(2006)，N Engl J Med.355(10)：973-975)。细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)就是这样一种影响T细胞功能的关键抑制性受体，在免疫应答的启动阶段发挥关键作用(ScalapinoKJ1，Daikh DI.(2008)，Immunol Rev.223：143-155)。当抗原被MHC-I类或II类抗原提呈细胞运输到T细胞受体(TCR)时，TCR上的信号就会放大，并被共刺激分子抵消。T细胞上的CD28与抗原提呈细胞上的B7-1(CD80)和B7-2(CD86)结合后，会发出一种需要T细胞全激活的信号。这种CD28/B7的结合导致白介素2及其他刺激性的细胞因子产生的增加，提高代谢，促进细胞周期进程，上调细胞存活基因，最终使T细胞得到增殖和分化。当CD28结合并引起T细胞增殖后，CTLA-4被运送并表达在T细胞表面(Linsley PS，et al.(1996)，Immunity.4(6)：535-543)。通过TCR的激活信号越强烈，就越多CTLA-4运送并表达。当在细胞表面上时，CTLA-4的抑制信号就被传播(Egen JG，Allison JP(2002)，Immunity.16(1)：23-25)。与CD28相比，CTLA-4与B7有更高的亲和力，并能阻碍更进一步的共激活(Krummel MF，AllisonJP(1995)，J Exp Med.182(2)：458-465)。并且，CTLA-4表达的细胞能通过内吞作用捕获和降解B7-1和B7-2(Qureshi OS，et a1.(2011)，Science.332(6029)：600-603)。