[发明专利]一种液体疫苗组合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种液体疫苗组合物，其中包括：白喉类毒素，破伤风类毒素，百日咳毒素，丝状血凝素，百日咳杆菌黏附素，灭活的I型脊髓灰质炎病毒Sabin毒株，灭活的II型脊髓灰质炎病毒Sabin毒株，灭活的III型脊髓灰质炎病毒Sabin毒株，b型流感嗜血杆菌荚膜多糖‑蛋白结合物。本发明提供的液体疫苗组合物避免了冻干工艺引入的安全性风险及产能的限制，同时避免了冻干疫苗在免疫接种前需进行的繁琐的复溶过程，降低了生产和使用的成本。进一步而言，本发明提供的疫苗组合物可以用于基础免疫或加强免疫，可以在确保安全性的基础上提高被免疫者血清中抗体的滴度。

技术领域

本发明涉及疫苗领域，具体涉及一种能够同时预防百日咳、白喉、破伤风、脊髓灰质炎以及b型流感嗜血杆菌的一种液体疫苗组合物。

背景技术

及时进行疫苗接种是有效的预防保护性措施。百日咳、白喉和破伤风联合疫苗(DTP)作为最早纳入WHO扩大免疫计划(EPI)的疫苗，已经在预防和控制这三种传染病方面发挥了重要作用。20世纪70年代，由于接种全细胞百白破疫苗(DTwP)后出现了严重的不良反应，日本及荷兰等国家出现了抵制疫苗接种及停用的现象，导致接种率下降，致使百日咳的发病率出现反弹。目前，绝大多数发达国家均通过共纯化或层析纯化制成副反应较小的无细胞百白破疫苗(DTaP)，作为基础的联合疫苗和常规免疫用疫苗。无细胞百日咳疫苗从生产工艺来讲可分为共纯化疫苗和层析纯化疫苗。目前中国和日本部分企业采用的是共纯化工艺，即细菌培养后，盐析沉淀PT、FHA及PRN等保护性抗原，然后用蔗糖密度梯度离心去除杂质，同时收集富含PT、FHA和PRN的有效成分。层析纯化是采用柱层析将不同的保护性抗原分别纯化，然后再将各抗原定量配比成疫苗。分离纯化法的成本较高，但优点是成分明确，容易进行质量控制，副作用更小。目前大多数发达国家均采用柱层析分离纯化各组份来生产无细胞百日咳疫苗。

脊髓灰质炎(WPV)是由脊髓灰质炎病毒I、II、III型引起的传播广泛且危害极大的急性传染病,能侵袭任何年龄段人群,但主要是3岁以下的儿童(占所有病例的50％),严重造成肢体不可逆转的麻痹甚至死亡。在疫苗问世前,该病在全世界范围内流行。50年代中后期,美国的两位科学家Salk和Sabin先后研制成功脊髓灰质炎灭活疫苗(InactivatedPoliovirus Vaccine，简称IPV)和口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(Oral PoliovirusVaccine，简称OPV)。从此人们有了预防和消灭脊髓灰质炎的有力武器,实践证明这两种疫苗都是有效的。世界卫生组织(World Health Organization，WHO)1988年发起全球范围内消灭脊髓灰质炎的倡议，此后，消灭脊髓灰质炎的活动在降低脊髓灰质炎的发病率和减少脊髓灰质炎病毒的传播范围方面都取得了重大进展。2007年1月～2008年6月，16个国家从AFP病例的粪便标本中检测到野毒株(WPV),只检测到WPVI型和WPVIII型，自1999年以来在全球范围内未检测到WPVII型,这些进步的取得归功于全世界共同实施的消灭脊髓灰质炎策略。在全球消灭脊髓灰质炎(WPV)行动中,口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)得到广泛应用，已大幅度降低全球脊髓灰质炎的发病率。然而，由于疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎(Vaccine Associated Paralytic Poliomyelitis，VAPP),和疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(Vaccine-derived Poliovirus，VDPV)风险，今后必须停止口服脊髓灰质炎减毒活疫苗OPV的使用，以彻底根除脊髓灰质炎。只有使用脊髓灰质炎灭活疫苗IPV才能避免VAPP和VDPV风险。脊髓灰质炎灭活疫苗可预防脊髓灰质炎IPV爆发,并能产生群体免疫力，是消灭脊髓灰质炎后续阶段的最佳选择。目前全球有生产厂商在生产IPV，但所使用的生产毒种均为野毒株。用野毒株生产IPV需达到生物安全水平3级(BSL-3)的要求,全世界消灭脊髓灰质炎后,甚至BSL-4的条件亦非绝对保证。对于疫苗生产厂家难以达到如此严格的生物安全要求，目前国内批准上市的DTaP-IPV/Hib联合疫苗仅有SanofiPasteur(SP)公司生产的PentaximTM，在该联合疫苗中，IPV疫苗选用的毒株为Salk株，但Salk株属于强野毒株，毒性较强，因而WHO鼓励疫苗生产厂家研发减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗Sabin IPV(InactivatedPoliovirus Vaccine，Sabin strain，简称sIPV)。迄今为止，全球已上市的多价次联合疫苗中，IPV选用的毒株大多为Salk株。因此，开发安全性和稳定性更高的含有sIPV的联合疫苗具有重要意义。