[发明专利]一种胰激肽原酶的检测方法

权利要求书

1.一种胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述方法如下所示：

底物配制：取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐，溶于三羟甲基氨基甲烷缓冲液中，制成底物溶液；

标准品溶液配制：取标准品配制成标准品溶液，所述标准品为能够作为标准的胰激肽原酶；

供试品溶液配制：取供试品配制成供试品溶液，所述供试品为待检测的胰激肽原酶；

检测方法：在含有多孔的酶标板微孔中，先在不同的孔中分别加入标准品溶液和供试品溶液，然后快速在每个微孔中加入N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐底物溶液，反应，测定不同不同时间点的吸光度的差值，通过对比计算标准品与供试品的差值，得出供试品效价。

2.根据权利要求1所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所配制的底物溶液为0.1～0.4mg/ml。

3.根据权利要求2所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：底物配制方法：取15～40mg N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐，溶于pH8.0三羟甲基氨基甲烷缓冲液中，制成浓度为0.25～0.4mg/ml的底物溶液。

4.根据权利要求3所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述底物溶液为0.35mg/ml。

5.根据权利要求1所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述标准品溶液和供试品溶液的配制方法一样，均为用pH7.0磷酸盐缓冲液制成2～15IU/ml溶液。

6.根据权利要求1所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述酶标板放置在酶标仪中。

7.根据权利要求6所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述酶标板为96孔酶标板。

8.根据权利要求7所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述检测方法的加样过程要在冰浴中进行。

9.根据权利要求8所述的胰激肽原酶的检测方法，其特征在于：所述检测方法为：在含有多孔的酶标板微孔中，分别加入10μL～30μL标准品溶液或供试品溶液，每份样品平行3管，然后用移液枪快速在每个微孔中加入100μL～250μL N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐底物溶液，25℃±0.5℃下反应，测定253nm波长处1分钟时的吸光度A和3分钟时的吸光度A的差值△A，通过对比计算标准品△A与供试品△A，得出供试品效价。