[发明专利]一种普卡那肽的固相合成方法

权利要求书

1.一种制备普卡那肽的方法，其特征在于：所述的制备方法包括如下步骤：

(1)将树脂固相载体和Fmoc-Leu-OH偶联，得到Fmoc-Leu-树脂后，脱除Fmoc保护基；得到H-Leu-树脂；

(2)通过固相合成法，在偶联剂系统的存在下，按普卡那肽序列由碳端向氮端依次将保护氨基酸和/或保护的二肽偶联到H-Leu-树脂上，制备得到线性普卡那肽的肽树脂；所述，普卡那肽序列从N-末端到C-末端的顺序为H-Asn¹-Asp²-Glu³-Cys⁴-Glu⁵-Leu⁶-Cys⁷-Val⁸-Asn⁹-Val¹⁰-Ala¹¹-Cys¹²-Thr¹³-Gly¹⁴-Cys¹⁵-Leu¹⁶-OH；二硫键(4-12)和(7-15)；

其中，所述在普卡那肽序列的Leu⁶、Val⁸、Val¹⁰、Ala¹¹、Gly¹⁴或Leu¹⁶中的一个或多个位置的保护氨基酸选自Dmb保护的氨基酸、Hmb保护的氨基酸、Fmoc-Hmb保护的氨基酸、Hnb保护的氨基酸、Hmsb保护的氨基酸、Mmsb保护的氨基酸、Mmtb保护的氨基酸中的一种或多种；

和/或，所述普卡那肽序列的Glu³-Cys⁴、Glu⁵-Leu⁶、Leu⁶-Cys⁷、Cys⁷-Val⁸、Asn⁹-Val¹⁰、Val¹⁰-Ala¹¹、Ala¹¹-Cys¹²、Cys¹²-Thr¹³、Thr¹³-Gly¹⁴或Gly¹⁴-Cys¹⁵中的一个或多个保护的二肽选自假脯氨酸二肽或Dmb二肽；

(3)线性普卡那肽的肽树脂经裂解，制得线性普卡那肽，再经液相环化，即得普卡那肽。

2.根据权利要求1所述的制备普卡那肽的方法，其特征在于：步骤(1)中所述脱除Fmoc保护基的试剂由体积比为1:1～10的哌啶和DMF组成；优选地，所述脱除Fmoc保护基的试剂由体积比为1:4的哌啶和DMF组成。

3.根据权利要求1所述的制备普卡那肽的方法，其特征在于：步骤(2)中所述Cys的侧链保护基团包括Trt、Mmt、tBu、StBu、Acm或Npys，其中4和12位的保护基团不同于7和15位；优选地，所述Cys的侧链保护基团选自Trt和Acm保护基。