[发明专利]一种嗜酸乳杆菌产细菌素及其分离纯化方法

权利要求书

1.一种嗜酸乳杆菌产细菌素，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌产细菌素的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，将该细菌素发酵液经依次经过经过陶瓷膜、10kDa超滤膜和1kDa超滤膜过滤过滤处理，将经上述1kDa超滤膜过滤后的截留液进行真空浓缩，得到细菌素粗提物；

步骤二，将步骤一的细菌素粗提物经过Sephadex G-25分离，收集活性馏分；

步骤三，将步骤二得到的活性馏分通过高效液相色谱法(HPLC)分离纯化，即得细菌素。

3.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化方法，其特征在于，步骤二中的分离步骤为：将细菌素粗提物上样于Sephadex G-25，蒸馏水洗脱，流速1.5-3ml/min，根据洗脱峰收集馏分，洗脱1h-3h，收集第一个洗脱峰的活性馏分。

4.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化方法，其特征在于，步骤三采用的色谱柱为RP-C8。

5.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化方法，其特征在于，步骤三的流动相包括：A相为0.1％TFA水溶液和B相为含0.1％TFA的80％乙腈溶液。

6.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化方法，其特征在于，步骤三的洗脱条件为：流速为3-5ml/min，洗脱时间为30-50min。

7.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化方法，其特征在于，所述细菌素发酵液的获得过程为：将嗜酸乳杆菌接种于试管斜面MRS琼脂培养基上活化菌种，37℃培养24h；然后将活化好的菌种接种于MRS液体培养基，37℃静止培养16～20h制得种子液；将嗜酸乳杆菌种子液按2％接种量接种到MRS培养基中，37℃静止培养36h，得细菌素发酵液。