[发明专利]生物标记物的保存液、荧光示踪物试剂以及免疫检测方法有效
申请号: | 201911384038.2 | 申请日: | 2019-12-28 |
公开(公告)号: | CN113049806B | 公开(公告)日: | 2023-03-28 |
发明(设计)人: | 邝俊韬;李嫚莉;陆锋 | 申请(专利权)人: | 深圳市帝迈生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N21/64 |
代理公司: | 深圳市威世博知识产权代理事务所(普通合伙) 44280 | 代理人: | 黎坚怡 |
地址: | 518107 广东省深圳市光明区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 标记 保存 荧光 示踪物 试剂 以及 免疫 检测 方法 | ||
1.一种生物标记物的保存液,其特征在于,包括:
至少一种抗荧光淬灭剂,所述抗荧光淬灭剂的浓度为2-6 mmol/L;
水溶性蛋白保护剂,所述水溶性蛋白保护剂选自牛血清白蛋白,所述水溶性蛋白保护剂的添加量为所述保存液总质量的0.1-2%;
缓冲溶液,所述缓冲溶液的浓度为0.01-0.5 mol/L,所述缓冲溶液为pH值为7.4的磷酸盐缓冲液;
抗氧化剂,所述抗氧化剂选自乙二胺四乙酸钠盐,所述抗氧化剂的浓度为1-20 mmol/L;
防腐剂,所述防腐剂选自Proclin300,所述防腐剂的添加量为所述保存液总质量的0.04-0.06%;
其中,所述抗荧光淬灭剂选自:含有浓度为2-7 mmol/L P-苯二胺(Para-phenylenediamine,PPD)的甘油溶液、含有浓度为3-9 mmol/L n-丙基没食子酸盐(propyl gallate,NPG)的甘油溶液、含有质量百分比浓度为0.1-4%三乙烯二胺(1,4-diazobicyelo(2,2,2)-octane,DABCO)的甘油溶液中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的保存液,其特征在于,所述pH值为7.4的磷酸盐缓冲液为将0.2克磷酸二氢钾、2.9克十二水合磷酸氢二钠、8.0克氯化钠、0.2克氯化钾、0.5mL吐温-20加至1L蒸馏水中而得。
3.一种荧光示踪物试剂,其特征在于,所述荧光示踪物试剂包括荧光标记物和如权利要求1-2任一项所述的保存液。
4.根据权利要求3所述的试剂,其特征在于,
所述荧光示踪物选自小分子荧光素、荧光蛋白或串联荧光染料。
5.根据权利要求4所述的试剂,其特征在于,
所述荧光蛋白选自藻红蛋白、藻蓝蛋白、藻红蓝蛋白以及别藻蓝蛋白中的至少一种;
所述小分子荧光素选自FITC、Cy5、Cy3、Cy5.5、Alexa Flour系列荧光素、Dylight系列荧光素、Pacific blue、FAM、TRITC、TAMRA以及罗丹明中的至少一种;
所述串联荧光染料为链霉亲和素-藻红蛋白(SAPE)。
6.一种免疫检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
制备荧光示踪物组合物,所述荧光示踪物组合物包括荧光示踪物以及如权利要求1-2任一项所述的保存液;
向检测体系中加入捕获免疫组合物和检测免疫组合物,混合待测样本与所述捕获免疫组合物、所述检测免疫组合物;
孵育预设时间后,磁分离清洗,获得多个免疫复合物;
混合所述免疫复合物与所述荧光示踪物组合物,获得待测复合物;
检测多个所述待测复合物的荧光强度值。
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