[发明专利]生物标记物的保存液、荧光示踪物试剂以及免疫检测方法有效

专利信息
申请号: 201911384038.2 申请日: 2019-12-28
公开(公告)号: CN113049806B 公开(公告)日: 2023-03-28
发明(设计)人: 邝俊韬;李嫚莉;陆锋 申请(专利权)人: 深圳市帝迈生物技术有限公司
主分类号: G01N33/533 分类号: G01N33/533;G01N21/64
代理公司: 深圳市威世博知识产权代理事务所(普通合伙) 44280 代理人: 黎坚怡
地址: 518107 广东省深圳市光明区*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 生物 标记 保存 荧光 示踪物 试剂 以及 免疫 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种生物标记物的保存液,其特征在于,包括:

至少一种抗荧光淬灭剂,所述抗荧光淬灭剂的浓度为2-6 mmol/L;

水溶性蛋白保护剂,所述水溶性蛋白保护剂选自牛血清白蛋白,所述水溶性蛋白保护剂的添加量为所述保存液总质量的0.1-2%;

缓冲溶液,所述缓冲溶液的浓度为0.01-0.5 mol/L,所述缓冲溶液为pH值为7.4的磷酸盐缓冲液;

抗氧化剂,所述抗氧化剂选自乙二胺四乙酸钠盐,所述抗氧化剂的浓度为1-20 mmol/L;

防腐剂,所述防腐剂选自Proclin300,所述防腐剂的添加量为所述保存液总质量的0.04-0.06%;

其中,所述抗荧光淬灭剂选自:含有浓度为2-7 mmol/L P-苯二胺(Para-phenylenediamine,PPD)的甘油溶液、含有浓度为3-9 mmol/L n-丙基没食子酸盐(propyl gallate,NPG)的甘油溶液、含有质量百分比浓度为0.1-4%三乙烯二胺(1,4-diazobicyelo(2,2,2)-octane,DABCO)的甘油溶液中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的保存液,其特征在于,所述pH值为7.4的磷酸盐缓冲液为将0.2克磷酸二氢钾、2.9克十二水合磷酸氢二钠、8.0克氯化钠、0.2克氯化钾、0.5mL吐温-20加至1L蒸馏水中而得。

3.一种荧光示踪物试剂,其特征在于,所述荧光示踪物试剂包括荧光标记物和如权利要求1-2任一项所述的保存液。

4.根据权利要求3所述的试剂,其特征在于,

所述荧光示踪物选自小分子荧光素、荧光蛋白或串联荧光染料。

5.根据权利要求4所述的试剂,其特征在于,

所述荧光蛋白选自藻红蛋白、藻蓝蛋白、藻红蓝蛋白以及别藻蓝蛋白中的至少一种;

所述小分子荧光素选自FITC、Cy5、Cy3、Cy5.5、Alexa Flour系列荧光素、Dylight系列荧光素、Pacific blue、FAM、TRITC、TAMRA以及罗丹明中的至少一种;

所述串联荧光染料为链霉亲和素-藻红蛋白(SAPE)。

6.一种免疫检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

制备荧光示踪物组合物,所述荧光示踪物组合物包括荧光示踪物以及如权利要求1-2任一项所述的保存液;

向检测体系中加入捕获免疫组合物和检测免疫组合物,混合待测样本与所述捕获免疫组合物、所述检测免疫组合物;

孵育预设时间后,磁分离清洗,获得多个免疫复合物;

混合所述免疫复合物与所述荧光示踪物组合物,获得待测复合物;

检测多个所述待测复合物的荧光强度值。

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