[发明专利]一种降钙素原(PCT)的检测试剂及其制备方法在审
申请号: | 201911386655.6 | 申请日: | 2019-12-30 |
公开(公告)号: | CN111007267A | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 王明;汪春芳;陈胜胜 | 申请(专利权)人: | 苏州康和顺医疗技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74;G01N21/51;G01N21/59 |
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地址: | 215010 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 降钙素 pct 检测 试剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种降钙素原(PCT)胶乳增强免疫比浊检测单试剂,其特征在于所述单试剂包括0.15mg/mL的PCT抗体致敏胶乳颗粒、10mM乙二胺四乙酸二钠、10g/L精氨酸、3g/L牛血清白蛋白、5-10g/L聚乙烯磺酸钠、1-2g/L十二烷基聚乙二醇醚以及1g/L Proclin300,pH=6.5,其中聚乙烯磺酸钠与十二烷基聚乙二醇醚的比例为5:1;
其中所述的PCT抗体致敏胶乳颗粒是按照如下方法制备的:
(1)制备活化胶乳颗粒:取粒径309nm、浓度为10mg/mL的羧基化聚苯乙烯微球0.18mL,加入25mM pH6.5的MES 3.6mL,搅拌10min,加入EDC活化剂粉末7.04mg,室温搅拌2.5h后12000rpm离心收集沉淀,25mM pH6.5的MES 1.8mL 重悬沉淀;
(2)制备致敏胶乳颗粒:1.8mL 25mM pH6.5的MES中放入0.18mL浓度为4.0mg/mL的PCT多克隆抗体,搅拌1min,制成待偶联抗体溶液;将(1)中的活化胶乳颗粒快速倒入待偶联抗体溶液中,搅拌2.5h;12000rpm离心收集沉淀,120mL封闭液重悬后搅拌2.5h即得单试剂降钙素原(PCT)胶乳增强免疫比浊试剂;封闭液的组分为10mM乙二胺四乙酸二钠、10g/L精氨酸、3g/L牛血清白蛋白、5-10g/L聚乙烯磺酸钠、1-2g/L十二烷基聚乙二醇醚以及1g/LProclin300,pH=6.5,聚乙烯磺酸钠与十二烷基聚乙二醇醚的比例为5:1。
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