[发明专利]一种EGFR基因突变检测试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201911395799.8 | 申请日： | 2019-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN110964828A | 公开（公告）日： | 2020-04-07 |
| 发明（设计）人： | 赵平锋 | 申请（专利权）人： | 武汉光谷联合医学检验所股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 武汉红观专利代理事务所(普通合伙) 42247 | 代理人： | 张文俊 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 egfr 基因突变 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种EGFR基因突变检测试剂盒，包括PCR反应液、引物探针混合液、阳性质控品和阴性质控品，其特征在于：所述引物探针混合液包括正向引物1-4和反向引物1-4，所述正向引物1-4的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.14所示，所述反向引物1-4的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.15所示。
2.如权利要求1所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述引物探针混合液还包括荧光探针1-4，所述荧光探针1-4的序列分别如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.7、SEQ IDNO.11、SEQ ID NO.16所示，其5’端均标记有荧光基团，3’端均标记有能够淬灭相应5’端荧光基团所发射荧光信号的淬灭基团。
3.如权利要求1所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述引物探针混合液还包括锁核酸探针1-5，所述锁核酸探针1-5的序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.8、SEQ IDNO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.17所示，其3’端均连接有PO4基团。
4.如权利要求3所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述锁核酸探针1序列的第2、5、8、9、10、12个碱基进行LAN修饰。
5.如权利要求3所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述锁核酸探针2序列的第3、5、7、9、12、14个碱基进行LAN修饰。
6.如权利要求3所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述锁核酸探针3序列的第2、4、7、9、11、13个碱基进行LAN修饰，所述锁核酸探针4序列的第3、5、8、11、14、17、19个碱基进行LAN修饰。
7.如权利要求3所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述锁核酸探针5序列的第2、5、7、9、10、13个碱基进行LAN修饰。
8.如权利要求1所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述PCR反应液包括UNG酶和dUTP。
9.如权利要求1所述的EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述阳性质控品为含EGFR基因突变片段的人工质粒。
10.一种EGFR基因突变的检测方法，其特征在于：采用权利要求1-9任一所述的EGFR基因突变检测试剂盒，以待测样本核酸为模板，进行荧光定量PCR检测。
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