[发明专利]一种野生铁核桃粕中多肽的提取及抗氧化测定方法

说明书

本发明属于肽或蛋白质的制备技术领域，公开了一种野生铁核桃粕中多肽的提取制备及抗氧化测定方法，配制核桃粕溶液，向配制好的核桃粕溶液中加入NaOH，调节溶液pH值为中性；向调节好的中性溶液中加入复合酶水解3小时；在80～85℃下灭活蛋白酶10min；利用离心机以3000r/min的速度离心15min，取上清，即为核桃粕多肽溶液。本发明提供一种利用野生核桃提取多肽的方法，提取效率高，且方法简单，同时本发明分析核桃粕多肽的抗氧化性为核桃的二次开发利用提供了基本的理论基础，也为开发相关的功能性食物产品提供了有效直观的数据支持。

技术领域

本发明属于肽或蛋白质的制备技术领域，尤其涉及一种野生铁核桃粕中多肽的提取及抗氧化测定方法。

背景技术

目前，最接近的现有技术：野生铁核桃(J.sigillata Dode)，树平均高度10～20m，多年生落叶乔木，它们的平均树龄可达百年，主要分布于我国的云南、四川的南部等地。野生铁核桃具有较高的营养价值和商业价值。核桃蛋白是一种很好的植物蛋白，它的主要成分含有蛋白、球蛋白、醇溶谷蛋白和谷蛋白，分别占该品种核桃蛋白总量的6.81％、17.57％、5.33％和70.11％，由于受到植物品种性状特征的影响，优质品种的核桃如泡核桃和外来的美国山核桃等对核桃产业发展冲击，野生铁核桃的植物群落正在逐年递减，甚至在部分山区已经很难看到它的身影。以往野生铁核桃的主要用途是榨油，其野生铁核桃核桃油中主要成分是亚油酸和亚麻酸，占比在70％以上。值得一提的是，野生铁核桃的硫含量在50％左右，这与人脑的脂肪含量基本相同。

核桃粕是核桃压榨制油过程中产生的副产品，其中30％以上含量为核桃蛋白，核桃粕是优质的物美价廉并且产量丰富的植物性蛋白源。核桃中优质蛋白的含量达到15％以上，它的真实消化率和净蛋白比值都较高，各种氨基酸含量也都接近或超过人体必需量的标准值。虽然核桃粕具有以上所述的种种优点，但是在日常工业榨油过程中，提取核桃油后的核桃粕其作用大多为动物饲料。因此，核桃粕未能得到充分的开发和利用。

肽(Peptide)是由10～100个α-氨基酸脱水缩合而形成的化合物，分子质量低于10000Da，作为蛋白质水解过程中的中间产物。核桃多肽溶解性较高，同时受pH的影响较小。同时核桃多肽的浓度高，粘度低，并且具有很强的还原能力。

现有技术对多肽进行分析主要分析对象是大豆多肽。随着对多肽的分析深入，分析过程中逐步对一些多肽的分子结构和生理活性间的结构关系有了清晰的了解，并且确定了多肽的医疗保健功能。

综上所述，现有技术存在的问题是：现有技术中并无有效的能从核桃粕中提取多肽的方法。现有技术中提取多肽的方法，提取效率低，且方法复杂。

解决上述技术问题的难度：在提取多肽过程中要严格控制复合酶的比例，加酶量以及酶解时间。

解决上述技术问题的意义：促进核桃废弃物核桃粕的开发及利用。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种野生铁核桃粕中多肽的提取及抗氧化测定方法。本发明从核桃废弃物核桃粕中提取多肽，并分析多肽的抗氧化活性。专利中的多肽提取技术及抗氧化方法均是参考别人文献，和现有技术类似。目前关于核桃粕多肽的分析未见报道。

本发明是这样实现的，一种野生铁核桃粕中多肽的提取方法，所述野生铁核桃粕中多肽的提取方法包括以下步骤：

步骤一，配制核桃粕溶液，向配制好的核桃粕溶液中加入NaOH，调节溶液pH值为中性；

步骤二，向调节好的中性溶液中加入复合酶水解3小时；

步骤三，在80～85℃下灭活蛋白酶10min；

步骤四，利用离心机以3000r/min的速度离心15min，取上清，即为核桃粕多肽溶液。

进一步，步骤一中，所述核桃粕溶液配制方法包括：