[发明专利]一种硒酸酯化玉竹多糖及其制备方法

权利要求书

1.一种硒酸酯化玉竹多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤S1，玉竹多糖溶液提取：精密称取玉竹多糖0.5-5g置于三口烧瓶中，加入一定浓度HNO₃溶液50-150mL，加热并搅拌使多糖溶解完全，得到浓度为5-15mg/mL的玉竹多糖溶液；

步骤S2，多糖与Na₂SeO₃反应：将步骤S1中玉竹多糖溶液调节水浴温度至设定值，加入一定质量Na₂SeO₃，使多糖与Na₂SeO₃两种原料配比达到设定值，再加入0.5-3g BaCl₂反应至设定时间；

步骤S3，Ba²⁺沉淀：步骤S2反应结束后，将反应液自然冷却至室温，抽滤，滤液中加入适量5-15％Na₂SeO₃，使Ba²⁺沉淀完全，然后以2000-4000r/min离心5-20min，得上清液；

步骤S4，玉竹多糖硒酸酯化：将步骤S3上清液中先加入适量3-8％FeCl₃溶液使SeO₃^2-沉淀完全，再用pH7.5-10.0的NH₃-NH₄C1缓冲液调节pH为5-7，搅拌20-40min，放置过夜，然后再以2000-4000/min离心5-20min，得上清液；

步骤S5：将步骤S4上清液采用流水透析6-10h，截留分子量3000-4000Da，取少量透析液加入Vc检测，直至无血红色现象为止，然后真空浓缩至10-30mL，加入无水乙醇使其体积分数达到70-90％，然后在2-6℃冰箱中放置过夜，以2000-4000r/min离心5-20min，得沉淀物；

步骤S6：步骤S5中沉淀用丙酮洗涤1-3次，然后再经冷冻干燥，得玉竹多糖硒酸酯；

步骤S7：步骤S6中冷冻干燥温度为-15℃至-35℃，压力为0.01-0.05MPa。

2.根据权利要求1所述的硒酸酯化玉竹多糖的制备方法，其特征在于，步骤S1包括：精密称取玉竹多糖1.0g置于三口烧瓶中，加入一定浓度HNO₃溶液100mL，加热并搅拌使多糖溶解完全，得到浓度为10mg/mL的玉竹多糖溶液。

3.根据权利要求1所述的硒酸酯化玉竹多糖的制备方法，其特征在于，步骤S2包括：玉竹多糖溶液调节水浴温度至设定值，加入一定质量Na₂SeO₃，使多糖与Na₂SeO₃两种原料配比达到设定值，再加入1.5g BaCl₂反应至设定时间。

4.根据权利要求1所述的硒酸酯化玉竹多糖的制备方法，其特征在于，步骤S3包括：反应结束后，将反应液自然冷却至室温，抽滤，滤液中加入适量10％Na₂SeO₃，使Ba²⁺沉淀完全，然后以3000r/min离心15min，得上清液。

5.根据权利要求1所述的硒酸酯化玉竹多糖的制备方法，其特征在于，步骤S4包括：上清液中先加入适量5％FeCl₃溶液使SeO₃^2-沉淀完全，再用pH10.0的NH₃-NH₄C1缓冲液调节pH为6.5，搅拌30min，放置过夜，然后再以3000/min离心15min，得上清液。

6.根据权利要求1所述的硒酸酯化玉竹多糖的制备方法，其特征在于，步骤S5包括：上清液采用流水透析8h，截留分子量3500Da，取少量透析液加入Vc检测，直至无血红色现象为止，然后真空浓缩至20mL，加入无水乙醇使其体积分数达到85％，然后在4℃冰箱中放置过夜，以3000r/min离心15min，得沉淀物。