[发明专利]注射用重组人特立帕肽中咪唑残留的分析方法

说明书

本发明提供了一种注射用重组人特立帕肽中咪唑残留的分析方法。该分析方法包括：采用C18色谱柱，以溶液a和溶液b的混合溶液为流动相对注射用重组人特立帕肽中的咪唑残留进行高效液相色谱分析；其中，溶液a为0.4～0.6mg/ml辛烷磺酸钠水溶液，溶液b为乙腈‑甲醇溶液，乙腈‑甲醇溶液中乙腈与甲醇的体积比为20:80‑60:40。该分析方法能够使咪唑残留的出峰时间、峰型、分离度均良好，并通过咪唑限量检测法验证该分析方法的专属性、检测限与定量限、线性、重复性、准确性及耐用性均良好，将其应用于PTH中咪唑残留分析中有助于实现对PTH生产工艺过程和产品质量安全的控制。

技术领域

本发明涉及残留物分析领域，具体而言，涉及一种注射用重组人特立帕肽中咪唑残留的分析方法。

背景技术

针对咪唑残留物的检测，现有技术有针对动物源食品(比如猪肉、猪肝等)中的硝基咪唑残留进行检测的报道。其检测原理是将动物组织样品经乙酸乙酯振荡提取、液液分配和固相萃取净化后，用液相色谱-串联质谱检测，外标法定量。也有针对水产品中左旋咪唑采用液相色谱-串联质谱法进行检测的报道，其检测原理是：在碱性条件下直接用乙酸乙酯提取样品中的左旋咪唑，酸性水溶液萃取，酸性条件下用阳离子交换柱净化。还有针对保鲜剂噻苯咪唑残留的薄层色谱检测方法。

但针对生物制剂产品，如注射用重组人特立帕肽(PTH)，一种用于治疗骨质疏松症的药物，现有技术中却未见有针对此类产品的原液及原液的中间产品进行咪唑残留检测的报道，然而，对咪唑的限量进行控制以达到在生产工艺过程和产品质量安全的控制，是此类生物制剂产品开发所必不可少的质控步骤。

因此，急需提供一种针对注射用重组人特立帕肽(PTH)及其它生物制剂类产品中咪唑残留进行分析的方法。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种注射用重组人特立帕肽中咪唑残留的分析方法，以解决现有技术中尚无对注射用重组人特立帕肽等生物制剂类产品中的咪唑残留进行分析的问题。

为了实现上述目的，本发明提供了一种注射用重组人特立帕肽中咪唑残留的分析方法，该分析方法包括：采用C18色谱柱，以溶液a和溶液b的混合溶液为流动相对注射用重组人特立帕肽中的咪唑残留进行高效液相色谱分析；其中，溶液a为0.4～0.6mg/ml辛烷磺酸钠水溶液，溶液b为乙腈-甲醇溶液，乙腈-甲醇溶液中乙腈与甲醇的体积比为20:80-60:40。

进一步地，注射用重组人特立帕肽的进样量为10-30μL。

进一步地，溶液a与溶液b的体积比为76：24～80:20。

进一步地，色谱柱的柱温为33～37℃。

进一步地，C18色谱柱的规格为4.6mm*250mm，5μm。

进一步地，流动相的流速为0.9～1.1ml/min。

进一步地，高效液相色谱分析是在209-211nm紫外波长下对咪唑残留进行检测。

进一步地，辛烷磺酸钠水溶液的pH值为2.35±0.05。

进一步地，采用磷酸调节辛烷磺酸钠水溶液的pH值。

应用本发明的技术方案，采用C18色谱柱，并采用无机相和有机相混合形成的混合溶液作为流动相进行高效液相色谱分析，其中，无机相采用辛烷磺酸钠水溶液，而有机相采用乙腈与甲醇按照上述体积比混合而成的混合液，这样形成的流动相在分析过程中能够使咪唑残留的出峰时间、峰型、分离度均良好，并通过咪唑限量检测法对该分析方法的专属性、检测限与定量限、线性、重复性、准确性及耐用性进行了验证，且验证结果良好。应用于PTH中咪唑残留分析中有助于实现对PTH生产工艺过程和产品质量安全的控制。

附图说明