[发明专利]作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法

权利要求书

1.一种作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S101：将全血放入离心机中将血小板与所述全血中的其他成分离心分离；

S102：然后在无菌条件下分离出所述血小板并收集，然后将所述血小板破裂；

S103：将破裂的所述血小板采用离心机进行离心分离，并收集滤液进行无菌化处理，得到血小板裂解物；

S104：采用血小板裂解物的质量浓度为5％～20％的DMEM培养液培养牙齿的牙髓间充质细胞，并通过检测其各项实验室指标选择最适血小板裂解液浓度。

2.根据权利要求1所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S104中，所述牙齿采用拔除的废用健康智齿或矫正所拔除的健康正畸牙。

3.根据权利要求1所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S104中，所述各项实验室指标包括检测细胞增殖速度、活细胞比例和所培养的细胞与传统培养模式下的细胞成骨能力的对比。

4.根据权利要求1所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S101中，所述全血取源于健康人体，且至少取自两个人。

5.根据权利要求1所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S101中，所述离心分离时的旋转半径为5cm～7cm，转速为2500r/min～3000r/min，离心分离的时间为10min～15min。

6.根据权利要求1所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S103中，所述离心分离时的旋转半径为8cm～12cm，转速为2700r/min～3200r/min，离心分离的时间为8min～12min。

7.根据权利要求1所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S102中，将所述血小板进行破裂时，采用低温-高温冻融循环的方式，首先在-82℃～-78℃温度下冷冻10h～14h，然后在35℃～40℃温度下融化1.5h～2.5h。

8.根据权利要求7所述的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液制备方法，其特征在于，在所述步骤S102中，所述低温-高温冻融循环的方式反复进行三次。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法制备的作为牙髓间充质细胞体外培养的自体血小板裂解液。