[发明专利]一种利非司特有关物质的检测方法

说明书

本发明公开了一种利非司特有关物质的检测方法，具体步骤如下：a、取利非司特，加乙腈水溶液溶解，得供试品溶液；b、取利非司特对照品和杂质对照品，加乙腈水溶液溶解，得分离度溶液；c、采用高效液相色谱法分别对分离度溶液，供试品溶液、对照溶液进行检测。本发明方法检测可以将利非司特与有关物质有效分离，准确测定利非司特中有关物质含量，测定结果可靠，专属性强，灵敏度高，准确度，线性良好，可以有效控制利非司特的产品质量。

技术领域

本发明涉及利非司特有关物质的检测方法，属于医药领域。

背景技术

利非司特(lifitegrast)由爱尔兰夏尔开发公司(Shire Dev Llc)研发，是新型的小分子整合素(integrin)抑制药，能拮抗淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)，阻断与其同源配体细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的相互作用，干扰引起干眼病的角膜与结膜组织的ICAM-1过度表达，是首个治疗干眼症症状和体征的药物。

利非司特的化学名称为(S)-2-[2-(苯并呋喃-6-羰基)-5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺基]-3-(3-甲磺酰基苯基)丙酸，化学式为C₂₉H₂₄C₁₂N₂O₇S，CAS号为:1025967-78-5，结构式如下：

解析利非司特的化学结构和合成工艺，利非司特至少含有A,B,C,D,E,F 6个有关物质，开发该6个有关物质的检测方法，并进行定性定量分析，可严格控制利非司特的质量品质，从而保证产品质量符合要求。利非司特的有关物质分析如下：

发明内容

为了有效控制利非司特的质量品质，本发明提供了一种高效液相色谱法测定利非司特有关物质A,B,C,D,E,F的检测方法。

本发明提供的一种利非司特有关物质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：

a、取利非司特，加乙腈水溶液溶解，得供试品溶液；

b、取利非司特对照品和有关物质对照品，用乙腈水溶液溶解，得分离度溶液；

c、采用如下色谱条件分别对供试品溶液、分离度溶液进行检测：

固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：以0.01～1.0％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B；

梯度洗脱程序为：0～20min，70～80％→30～40％A，20～25min，30～40％→5～15％A，25.01～40min，70～80％A；

检测波长：200～250nm；

流速为0.5～1.5ml/min；

柱温为20～40℃。

进一步地，步骤a)所述利非司特与乙腈水溶液的质量体积比为0.3～1.0mg：1ml。

更进一步地，所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为25：75。

进一步地，步骤b)所述有关物质为杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F；所述分离度溶液每1ml含各杂质0.5～1.5ug，利非司特0.3～1.0mg，优选，每1ml含各杂质1ug，利非司特0.5mg。

进一步地，所述的固定相为Inertsil ODS-3柱；色谱柱规格为：内径4.6×250mm，5um。

进一步地，步骤c)所述检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样量10ul。