[发明专利]一种结核杆菌耐药性检测试剂盒及结核杆菌耐药性检测方法

权利要求书

1.一种结核杆菌耐药性检测试剂盒，其特征在于，包含结核杆菌耐药性检测试剂，所述结核杆菌耐药性检测试剂包括针对结核杆菌耐药性基因的测序引物，所述结核杆菌耐药性基因包括rpoB、katG、inhA-promoter、inhA-structural、furA、embB、ubiA、pncA、rpsA、gyrA、gyrB、eis、rpsL、rrs、tlyA、rplC和rrl基因中的一种或多种；所述针对rpoB基因的测序引物序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示；针对katG基因的测序引物序列如SEQ IDNO.10和SEQ ID NO.11所示；针对inhA-promoter基因的测序引物序列如SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示；针对inhA-structural基因的测序引物序列如SEQ ID NO.14和SEQ IDNO.15所示；针对furA基因的测序引物序列如SEQ ID NO.16和SEQ ID NO.17所示；针对embB基因的测序引物序列如SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.19所示；针对ubiA基因的测序引物序列如SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.21所示；针对pncA基因的测序引物序列如SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.23所示；针对rpsA基因的测序引物序列如SEQ ID NO.24和SEQ ID NO.25所示；针对gyrA基因的测序引物序列如SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.27所示；针对gyrB基因的测序引物序列如SEQ ID NO.28和SEQ ID NO.29所示；针对eis基因的测序引物序列如SEQ IDNO.30和SEQ ID NO.31所示；针对rpsL基因的测序引物序列如SEQ ID NO.32和SEQ IDNO.33所示；针对rrs基因的测序引物序列如SEQ ID NO.34和SEQ ID NO.35所示；针对tlyA基因的测序引物序列如SEQ ID NO.36和SEQ ID NO.37所示；针对rplC基因的测序引物序列如SEQ ID NO.38和SEQ ID NO.39所示；针对rrl基因的测序引物序列如SEQ ID NO.40和SEQID NO.41所示。

2.根据权利要求1所述的结核杆菌耐药性检测试剂盒，其特征在于，还含有结核杆菌核酸检测试剂，所述结核杆菌核酸检测试剂包括针对IS6110的引物对1、针对IS6110的引物对2、针对IS6110的探针引物；

所述针对IS6110的引物对1包括序列如SEQ ID NO.1所示的IS6110-FW1和SEQ ID NO.2所示的IS6110-RV1；针对IS6110的引物对2包括序列如SEQ ID NO.3所示的IS6110-FW2和SEQ ID NO.4所示的IS6110-RV2；针对IS6110的探针引物序列如SEQ ID NO.5所示，探针引物的5’端修饰有荧光基团，3’端修饰有猝灭基团。

3.根据权利要求2所述的结核杆菌耐药性检测试剂盒，其特征在于，所述结核杆菌核酸检测试剂还包含内部质控模板和针对内部质控模板的探针引物；所述内部质控模板含有小鼠RAB3A癌基因片段和IS6110引物对2结合区域；所述内部质控模板序列如SEQ ID NO.6所示；针对内部质控模板的探针引物序列如SEQ ID NO.7所示，探针引物的5’端修饰有荧光基团，3’端修饰有猝灭基团，且所述荧光基团和猝灭基团与针对IS6110的探针引物的荧光基团和猝灭基团不相同。

4.根据权利要求1-3任一项所述的结核杆菌耐药性检测试剂盒，其特征在于，所述结核杆菌耐药性检测试剂盒还含有DNA纯化试剂，和/或Probe PCR Master Mix；所述DNA纯化试剂为Ampure xp Beads。