[发明专利]一种牛蟾颗粒的生产制备方法、及制备的牛蟾颗粒和应用

权利要求书

1.一种牛蟾颗粒的制备方法，其中，所述制备方法包括以下步骤：

步骤(1)称取4～5重量份人工牛黄、2～3重量份蟾酥、2～3重量份冰片、1000～1200重量份黄芩、200～300重量份甘草；

步骤(2)配制pH为3.5～6.0的柠檬酸缓冲液：0.1mol/L柠檬酸溶液，取柠檬酸21.01g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，0.1mol/L柠檬酸钠溶液，取柠檬酸钠29.41g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，0.1mol/L柠檬酸溶液与0.1mol/L柠檬酸钠溶液体积比为15.5:4.5～3.8:16.2；

步骤(3)将所述步骤(1)称取的人工牛黄、蟾酥加入100～150重量份鲜奶中研磨均匀，然后过滤，滤液备用；

步骤(4)取7重量份的磷脂和3重量份的胆固醇，加入无水乙醇50份，70～75℃水浴搅拌溶解并挥散乙醇，成膜后加入同温的所述步骤(2)配制的柠檬酸缓冲液100份，70～75℃水浴搅拌水化10min,随后室温搅拌30min,充分水化后补加蒸馏水至100份，经微孔滤膜过滤两遍进行整粒，得空白脂质体；

步骤(5)依次取所述步骤(4)制备的空白脂质体、所述步骤(3)制备的人工牛黄蟾酥液、碳酸氢钠溶液，混合振荡摇匀，70～75℃水浴中保温15min后，立即用冷水降温，得到人工牛黄蟾酥脂质体粗品；

步骤(6)将所述步骤(5)所得的人工牛黄蟾酥脂质体粗品进行低温高速离心处理，制得人工牛黄蟾酥脂质体；

步骤(7)将所述步骤(1)称取的冰片加入适量乙醇中溶解完全，加入适量吐温-80，摇匀，得到冰片液；

步骤(8)将所述步骤(1)称取的黄芩、甘草分别加水煎煮3～4次，将煎液合并、浓缩后喷雾干燥成粉末，与所述步骤(6)得到的物料混匀，然后加入适量水和辅料制粒，低温干燥后均匀喷入所述步骤(7)得到的冰片液，在密闭容器中放置24～48h，即得牛蟾颗粒。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述步骤(3)中过滤采用的筛网为80～100目。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述步骤(4)中微孔滤膜的孔径为0.8μm。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述步骤(5)中碳酸氢钠溶液的浓度为60mg/ml。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述步骤(5)中空白脂质体、人工牛黄蟾酥液、碳酸氢钠溶液的体积比为2：1：1，所述冷水降温至4℃。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述步骤(6)中低温高速离心的温度为4℃，转速为6000rpm,离心时间15min。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述步骤(2)中pH为3.5的柠檬酸缓冲液：0.1mol/L柠檬酸溶液，取柠檬酸21.01g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，0.1mol/L柠檬酸钠溶液，取柠檬酸钠29.41g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，两者体积比为15.5:4.5，混匀；或

所述步骤(2)中配制pH为5.0的柠檬酸缓冲液：0.1mol/L柠檬酸溶液，取柠檬酸21.01g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，0.1mol/L柠檬酸钠溶液，取柠檬酸钠29.41g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，两者体积比为8.2:11.8；或

所述步骤(2)中配制pH为6.0的柠檬酸缓冲液：0.1mol/L柠檬酸溶液，取柠檬酸21.01g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，0.1mol/L柠檬酸钠溶液，取柠檬酸钠29.41g,加纯化水1000ml,溶解，摇匀，两者体积比为3.8:16.2。

8.根据权利要求1～7所述制备方法制备的牛蟾颗粒。

9.根据权利要求8所述的牛蟾颗粒在制备治疗畜禽支气管病毒性感染的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述畜禽支气管病毒性感染包括猪瘟和鸡毒支原体感染。