[发明专利]一种女性脂肪组织用的冻存液及其制备方法和冻存方法

权利要求书

1.一种女性脂肪组织冻存液，其特征在于，由以下重量份物质组成：10份二甲基亚砜、12.5份海藻糖、5份雌二醇、72.5份DMEM高糖培养基；

所述的女性脂肪组织冻存方法，包括以下步骤：

（1）将脂肪组织样本无菌处理后置于40~60ml离心管中；

（2）用生理盐水对脂肪组织进行清洗后离心，使用20~30ml移液管将离心管下层生理盐水清洗液吸弃2~4次；所述生理盐水与脂肪组织的体积比为0.8~1.2:1；

（3）将冻存液与脂肪组织混匀，后将其先置于-25~-15°C冰箱20~40min再转移至-90~-70°C超低温冰箱中；所述冻存液与脂肪组织的体积比为0.8~1.2:1。

2.权利要求1所述的女性脂肪组织冻存液的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

（1）将海藻糖溶解于DMEM培养基，过滤；

（2）加入雌二醇溶解完全加入到无菌容器中；

（3）用移液管加入二甲基亚砜摇匀即可，将冻存液置于0~6℃冰箱保存。

3.根据权利要求2所述的女性脂肪组织冻存液的制备方法，其特征在于，所述过滤用细菌过滤器过滤。

4.一种使用权利要求1所述的女性脂肪组织冻存液的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将脂肪组织样本无菌处理后置于40~60ml离心管中；

（2）用生理盐水对脂肪组织进行清洗后离心，使用20~30ml移液管将离心管下层生理盐水清洗液吸弃2~4次；

（3）将冻存液与脂肪组织混匀，后将其先置于-25~-15°C冰箱20~40min再转移至-90~-70°C超低温冰箱中。

5.根据权利要求4所述的女性脂肪组织冻存液的使用方法，其特征在于，所述生理盐水与脂肪组织的体积比为0.8~1.2:1。

6.根据权利要求4所述的女性脂肪组织冻存液的使用方法，其特征在于，所述离心条件为：1200~1800r/min离心2~5min。

7.根据权利要求4所述的女性脂肪组织冻存液的使用方法，其特征在于，所述冻存液与脂肪组织的体积比为0.8~1.2:1。