[发明专利]一种钙卫蛋白单克隆抗体及其应用在审
申请号: | 201911424051.6 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN111004324A | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 陈菲;王莹 | 申请(专利权)人: | 苏州和锐生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;G01N33/68;G01N33/558 |
代理公司: | 苏州华博知识产权代理有限公司 32232 | 代理人: | 何蔚 |
地址: | 215000 江苏省苏州市工业园区星湖*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 单克隆抗体 及其 应用 | ||
1.一种钙卫蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述钙卫蛋白单克隆抗体包含重链可变区的VHCDR1-3和轻链可变区的VLCDR1-3;
VHCDR1:GGATTCACTAGTAGCTATGCC
VHCDR2:ATTAGTAGTTATGGTAGCACC
VHCDR3:GCAACCTACAGGTACGAAGGGTTTGCTTAC
VLCDR1:ACTGGGGCTGTTACAACTAGTAACTAT
VLCDR2:GGTACCAAC
VLCDR3:GCTCTATGGTACAGCAACCTTTGGGTG。
2.根据权利要求1所述的钙卫蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs:1-3所示:
SEQ ID NO:1Gly-Phe-Thr-Ser-Ser-Tyr-Ala
SEQ ID NO:2Ile-Ser-Ser-Tyr-Gly-Ser-Thr
SEQ ID NO:3Ala-Thr-Tyr-Arg-Tyr-Glu-Gly-Phe-Ala-Tyr。
3.根据权利要求1所述的钙卫蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs:4-6所示:
SEQ ID NO:4Thr-Gly-Ala-Val-Thr-Thr-Ser-Asn-Tyr
SEQ ID NO:5Gly-Thr-Asn
SEQ ID NO:6Ala-Leu-Trp-Tyr-Ser-Asn-Leu-Trp-Val。
4.一种根据权利要求1所述的钙卫蛋白单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
所述钙卫蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株分泌产生;所述杂交瘤细胞株制备方法包含以下步骤:
1)用天然提取的钙卫蛋白作为免疫抗原;
2)用1)制备的天然蛋白免疫小鼠;
3)骨髓瘤细胞悬液和免疫小鼠的脾脏B淋巴细胞进行细胞融合;
4)培养融合后的细胞,测杂交瘤效价,筛选对天然蛋白聚合体识别,不识别重组蛋白单体的阳性细胞株;
5)对单克隆的阳性杂交瘤细胞株测序获得权利要求1所述序列。
5.一种根据权利要求1所述的钙卫蛋白单克隆抗体在炎症性肠病免疫检测工具中的应用;
所述免疫检测工具包括炎症性肠病检测试剂盒。
6.根据权利要求5所述的钙卫蛋白单克隆抗体在炎症性肠病免疫检测工具中的应用,其特征在于,所述炎症性肠病检测试剂盒包括:
权利要求1-4所述抗体包被或标记的微球或固相膜、标准品A-H或定标芯片卡、阳性质控品和阴性质控品;所述标准品A-F为定值0μg/g、50μg/g、200μg/g、500μg/g、1000μg/g、2000μg/g。
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