[发明专利]带有电荷标签的核苷酸及其使用方法

权利要求书

1.一种方法，其包括：

检测被标记的核苷酸通过聚合酶向与模板多核苷酸链互补的新生多核苷酸链中的掺入，其中所述聚合酶通过系链而被栓系到固体载体导电通道，

所述被标记的核苷酸是式I的化合物，

其中，n是3至10的整数，

m是1至10的整数，

t是0至50的整数，

X₁是直接键、C₁-C₁₀烷基、C₁-C₁₀氧杂烷基、C₁-C₁₀硫杂烷基或C₁-C₁₀氮杂烷基，

X₂是C₁-C₂₀烷基，其中任选一个或多个单独的CH₂残基被肽键和(-O-CH₂-CH₂-)_a中的一个或多个替代，其中a是1至24的整数，

X₃是直接键或寡核苷酸，其中当所述标记靠近所述导电通道时，所述寡核苷酸与所述系链的受体区域杂交，

F₁选自荧光团和直接键，且F₂不存在或为荧光团，

A是或酰胺键，且

Y选自

q是1至100的整数，并且

B选自氨基酸、核苷酸、

其中各R选自Y、氢、和树状物；并且，其中当B是树状物时，q等于1，并且q数量个B具有电荷和电荷密度，并且

所述导电通道用于在掺入过程中检测被标记的核苷酸。

2.权利要求1的方法，其中电荷在约-100e与约+100e之间。

3.权利要求2的方法，其中电荷密度在每立方纳米约-100e与每立方纳米约+100e之间。

4.权利要求1的方法，其中电荷在约-200e至约+200e之间。

5.权利要求2的方法，其中电荷密度在每立方纳米约-200e和每立方纳米约+200e之间。

6.权利要求1的方法，其中q数量个B包括多核苷酸。

7.权利要求6的方法，其中多核苷酸选自分支多核苷酸、和一个或多个发夹环。

8.权利要求7的方法，其中多核苷酸包括两个至五个发夹环。

9.权利要求1的方法，其中q数量个B包括多肽。

10.权利要求9的方法，其中多肽选自分支多肽、卷曲多肽和卷曲螺旋多肽。

11.权利要求1的方法，其中B包括氨基酸，并且q数量个B中的一个或多个包括甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸或三甲基赖氨酸。

12.权利要求1的方法，其中B是包括一个或多个结构重复单元和多个末端单元的z代的树状物，其中z是1至6的整数，结构末端单元选自：

其中

p₁是1至3的整数，其中p₁个-CH₂-基团中的任一个或多个任选地被1至3个-O-CH₂-CH₂-基团替代，

p₂是1至3的整数，其中p₂个-CH₂-中的任一个或多个任选地被1-3个-O-CH₂-CH₂-基团替代，并且

端基选自羧酸、磺酸、膦酸、精胺基、氨基和季铵基。