[发明专利]2C型肢带型肌营养不良的基因疗法

说明书

本公开涉及包含编码γ‑肌聚糖（SGCG）的多核苷酸的基因疗法载体（例如AAV载体），以及使用此类基因疗法载体来治疗患有肌营养不良（例如2C型肢带型肌营养不良（LGMD2C））的对象的方法。

相关专利申请的交叉引用

本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2018年1月31日提交的美国临时专利申请62/624,616号的优先权，其全文以引用的方式并入本文。

序列表

本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且通过引用整体并入本文。所述ASCII副本创建于2019年1月25日，名为106887-7141_SL.txt，大小为18,760字节。

技术领域

本发明涉及基因疗法。更具体地，本公开提供了用于治疗肌营养不良(例如2C型肢带型肌营养不良(limb-girdle muscular dystrophy type 2C，LGMD2C))的基因疗法载体，例如腺相关病毒(AAV)载体。

背景技术

肌营养不良(muscular dystrophy，MD)是一组遗传疾病。该组的特征是进行性肌无力和控制运动的骨骼肌退化。某些形式的MD会发展于婴儿期或儿童时期，而另一些则可能直到中年或更晚才出现。这些疾病在肌肉无力的分布和程度方面有所不同——某些形式的MD也影响心肌、发病年龄、进展速度和遗传模式。

一个群组的MD是MD的肢带型分组(LGMD)。LGMD是罕见病，在发病年龄、肌肉无力区域、心脏和呼吸器官受累、进展速度和严重程度方面，在不同人群中表现不同。LGMD可以开始于童年、青春期、成年早期甚至更晚。无论男女同等地受到影响。LGMD会导致肩膀和骨盆带无力，有时大腿和手臂附近的肌肉也会随着时间而减弱。腿部无力通常先于手臂。面部肌肉通常不受影响。随着病情的发展，受影响的个体可能会出现行走问题，并可能需要长时间使用轮椅。肩膀和手臂肌肉的涉及可能导致举起手臂超过头顶和举起物体的困难。在某些类型的LGMD中，可能会涉及心脏和呼吸肌肉。

LGMD2C(2C型肢带型肌营养不良)是由γ-肌聚糖(sarcoglycan，SGCG)缺乏引起的。像其他肌聚糖病一样，它表现为进行性肌营养不良，始于肢带肌肉，然后延伸至下肢和上肢肌肉。展现通常发生在青少年中后期。在尝试治疗LGMD2C时，没有任何药物疗法(甚至包括皮质类固醇)能够改变疾病的进程。

患有LGMD2C和其他肌肉营养不良的患者的功能改善既需要基因恢复又需要减少纤维化。本领域需要用于治疗LGMD2C和其他肌肉营养不良的组合物和方法。

发明概述

本文描述了编码γ-肌聚糖的基因疗法载体(例如重组腺相关病毒(AAV)载体)，以及将编码γ-肌聚糖的此类载体递送至肌肉的方法，从而减少或预防纤维化、维持或改善肌肉功能、增加肌肉力量、增加肌肉耐力、或在患有肌营养不良的哺乳动物对象中治疗γ-肌聚糖病(sarcoglycanopathy)。

此外，本发明提供了使用基因疗法载体来递送γ-肌聚糖以解决在LGMD2C(2C型肢带型肌营养不良)中观察到的基因缺陷的疗法和方法。在一个方面，本文提供了一种用于以下中的一种或多种的方法：在有需要的对象中治疗γ-肌聚糖病；增加肌肉力量、肌肉耐力和/或肌肉质量；减少纤维化；减少收缩引起的损伤；减少脂肪浸润；和/或减少中央成核(central nucleation)，和/或在患有肌营养不良症的对象中治疗肌营养不良减少变性纤维或坏死纤维；减轻炎症；升高肌酸激酶水平；治疗肌纤维萎缩和肥大和/或减少营养不良性钙化，该方法包括向所述对象施用治疗有效量的重组腺相关病毒(AAV)载体、或者基本上该步骤组成、或者由该步骤组成，其中所述rAAV载体包含基因表达盒、或基本上由基因表达盒组成、或由基因表达盒组成，该基因表达盒包含在启动子的转录控制下编码γ-肌聚糖的多核苷酸序列、或基本上由该序列组成、或由该序列组成，所述盒的侧翼为一个或多个AAV反向末端重复。