[发明专利]心肌细胞的制备方法在审
| 申请号： | 201980010936.3 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN111684059A | 公开（公告）日： | 2020-09-18 |
| 发明（设计）人： | 戴平;武田行正;原田义规;松本润一;草鹿亚由美 | 申请（专利权）人： | 株式会社片冈制作所;京都府公立大学法人 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12N9/99 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 沈雪 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 心肌 细胞 制备 方法 | ||
1.一种心肌细胞的制备方法，其是通过直接分化诱导由体细胞制备心肌细胞的方法，该方法包括：在MEK抑制剂的存在下对体细胞进行培养的工序。
2.根据权利要求1所述的心肌细胞的制备方法，其中，所述工序是进一步在cAMP诱导剂的存在下对体细胞进行培养的工序。
3.根据权利要求1或2所述的心肌细胞的制备方法，其中，所述工序是进一步在选自TGF-β抑制剂、PDE4抑制剂、以及GR激动剂中的至少1种的存在下对体细胞进行培养的工序。
4.根据权利要求3所述的心肌细胞的制备方法，其中，所述工序是进一步在ERK抑制剂的存在下对体细胞进行培养的工序。
5.根据权利要求1～3中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，所述工序是在以下(1)～(6)中的任意组合的存在下对体细胞进行培养的工序，
(1)MEK抑制剂、cAMP诱导剂、以及TGF-β抑制剂、
(2)MEK抑制剂、cAMP诱导剂、以及PDE4抑制剂、
(3)MEK抑制剂、cAMP诱导剂、以及GR激动剂、
(4)MEK抑制剂、cAMP诱导剂、PDE4抑制剂、以及GR激动剂、
(5)MEK抑制剂、cAMP诱导剂、TGF-β抑制剂、PDE4抑制剂、以及GR激动剂、
(6)MEK抑制剂、cAMP诱导剂、TGF-β抑制剂、PDE4抑制剂、GR激动剂、以及ERK抑制剂。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，所述工序是进一步在选自RAR激动剂、RXR激动剂、以及PDK1激活剂中的至少1种的存在下对体细胞进行培养的工序。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，MEK抑制剂为PD0325901。
8.根据权利要求2～7中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，cAMP诱导剂为毛喉素。
9.根据权利要求3～8中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，TGF-β抑制剂为RepSox，PDE4抑制剂为咯利普兰，或者GR激动剂为地塞米松。
10.根据权利要求4～9中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，ERK抑制剂为GDC-0994。
11.一种心肌细胞的制备方法，其是通过直接分化诱导由体细胞制备心肌细胞的方法，该方法包括：在cAMP诱导剂、TGF-β抑制剂、PDE4抑制剂、GR激动剂、以及ERK抑制剂的存在下对体细胞进行培养的工序。
12.根据权利要求11所述的心肌细胞的制备方法，其中，cAMP诱导剂为毛喉素，TGF-β抑制剂为RepSox，PDE4抑制剂为咯利普兰，GR激动剂为地塞米松，或者ERK抑制剂为GDC-0994。
13.根据权利要求1～12中任一项所述的心肌细胞的制备方法，其中，所述体细胞为成纤维细胞。
14.一种心肌细胞，其是通过权利要求1～13中任一项所述的心肌细胞的制备方法制备的。
15.一种用于由体细胞制备心肌细胞的组合物，其是用于通过直接分化诱导由体细胞制备心肌细胞的组合物，所述组合物包含MEK抑制剂。
16.根据权利要求15所述的组合物，其进一步包含cAMP诱导剂。
17.根据权利要求15或16所述的组合物，其进一步包含选自TGF-β抑制剂、PDE4抑制剂、GR激动剂、以及ERK抑制剂中的至少1种。
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