[发明专利]发酵产物的制造方法

权利要求书

1.一种发酵产物的制造方法，其中，

所述发酵产物的制造方法是培养微生物制造发酵产物的方法，包括以下工序(A)～(D)：

(A)在第1培养基中培养微生物的工序；

(B)使含有培养后的菌体、培养原料及发酵产物的培养液在填充有吸附所述发酵产物的吸附剂且作为菌体的大小的短径d、吸附剂的细孔径D1及吸附剂之间的最小空隙直径D2满足D1dD2的关系的吸附塔内通液，从而使培养液中的发酵产物吸附于所述吸附剂，并回收从吸附塔流出的含有菌体及培养原料的流出液的工序；

(C)使洗脱液与所述吸附剂接触，从而使发酵产物洗脱的工序；

(D)在第2培养基中培养微生物的工序，其中，所述第2培养基使用含有所述回收的菌体和培养原料的流出液。

2.如权利要求1所述的发酵产物的制造方法，其中，

在工序(D)之后，进一步包括将工序(B)～(D)的操作重复1次以上的工序。

3.如权利要求2所述的发酵产物的制造方法，其中，

在工序(D)中，将使用含有回收的菌体和培养原料的流出液的培养基的pH值调节为在比工序(A)中培养时的平均pH值低1.2的值至比该平均pH值高1.2的值的范围内。

4.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

微生物为芽孢杆菌属细菌。

5.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

发酵产物为水解酶。

6.如权利要求5所述的发酵产物的制造方法，其中，

水解酶为碱性纤维素酶或碱性蛋白酶。

7.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

在工序(A)中，在第1培养基中培养微生物10小时～7天。

8.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(B)中的吸附剂的平均粒径D为30～2000μm。

9.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(B)中的最小空隙直径D2为1～500μm。

10.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(B)中的吸附剂的由下式(1)表示的粒径的变异系数CV为1～35％，

变异系数CV值(％)＝[粒径的标准偏差σ]/[平均粒径D]×100(式1)。

11.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(B)中，培养液中的作为菌体的大小的短径d相对于吸附剂的细孔径D1的比率d/D1为1.25～2000，其中，短径d和细孔径D1的单位均为μm。

12.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(B)中，吸附剂之间的最小空隙直径D2相对于培养液中的作为菌体的大小的短径d的比率D2/d为2～2000，其中，最小空隙直径D2和短径d的单位均为μm。

13.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(A)中的微生物为选自属于葡萄球菌(Staphylococcus)属、肠球菌(Enterococcus)属、李斯特菌(Listeria)属、芽孢杆菌(Bacillus)属、棒状杆菌属(Corynebacterium)的微生物中的1种或2种以上。

14.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

在供给工序(B)的培养液中，作为菌体的浓度的OD600值为20～100。

15.如权利要求1～3中任一项所述的发酵产物的制造方法，其中，

工序(D)中，使用包含工序(B)中回收的菌体和培养原料的流出液的部分或者全部。