[发明专利]工程化免疫细胞作为疾病的诊断探针

说明书

本文描述了经过基因工程化的免疫细胞的实施例，其基于免疫细胞迁移到病理部位的能力提供了可用于超灵敏疾病检测的一种新的基于细胞的体内传感器。所述基于细胞的传感器提供了用于早期癌症检测的方法并且允许使用工程化免疫细胞来监测包含但不限于癌症的多种疾病状态。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年2月27日提交的题为“工程化免疫细胞作为疾病的诊断探针(Engineered immune cells as diagnostic probes of disease)”的美国临时申请第62/635,664号以及于2019年1月18日提交的题为“工程化免疫细胞作为疾病的诊断探针(Engineered immune cells as diagnostic probes of disease)”的美国临时申请第62/794,011号的优先权，所述美国临时申请的全部内容通过引用并入本文。

关于联邦政府资助的研究或开发的声明

本发明是在政府支持下根据美国国立综合医学科学研究所(NationalInstitutes ofGeneral Medical Sciences)授予的合同GM007365进行的。政府享有本发明中的某些权利。

序列表

本申请含有作为ASCII.txt文件创建于2019年2月13日、以电子形式提交的题为“2219072430_ST25”的序列表。序列表的内容以其整体并入本文。

技术领域

本公开总体上涉及包括基因工程化免疫细胞的肿瘤或其它疾病的特异性探针。本公开总体上还涉及制造和使用该探针的方法。

背景技术

原发性疾病和复发的早期检测是显著降低全球癌症负担的有前景的途径。迄今为止，大多数早期检测工作均依赖于疾病状态特征的内源性生物标志物的检测。在癌症中，例如，包含蛋白质、循环肿瘤细胞(CTC)、无细胞循环肿瘤DNA(ctDNA)、癌症衍生的外来体、肿瘤教育的血小板和microRNA的生物标志物已经成为许多研究的主题。内源性生物标志物仍然处于早期疾病检测工作的最前沿，但是许多内源性生物标志物缺乏影响疾病管理所必需的敏感性和特异性。

发明内容

本公开涵盖最初可能或可能不是从患者中分离的新颖的工程化(经过基因修饰的)巨噬细胞的实施例。基因修饰是将编码可检测多肽或核酸(如miRNA)的基因表达盒引入到细胞中，并且处于由肿瘤或疾病特异性代谢因子诱导的基因启动子/增强子的表达控制下。

因此，本公开的一个方面涵盖经过基因修饰的免疫细胞的实施例，所述经过基因修饰的免疫细胞包括异源核酸，所述异源核酸被配置成响应于由接受所述经过基因修饰的免疫细胞的动物或人类受试者的病理状况引起的代谢或分子表达变化来表达可检测药剂。

在本公开的此方面的一些实施例中，所述经过基因修饰的免疫细胞可以是单核细胞、巨噬细胞、T细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞、骨髓细胞、干细胞或树突状细胞。

在本公开的此方面的一些实施例中，所述异源核酸可以包括至少一个基因表达盒，所述至少一个基因表达盒包括可操作地连接到编码可检测药剂的核酸序列的基因表达调控区，并且其中所述基因表达调控区可以响应于所述经过基因修饰的免疫细胞中的病理学特异性代谢变化以诱导所述可检测药剂的表达。

在本公开的此方面的一些实施例中，所述异源核酸可以是核酸载体。

在本公开的此方面的一些实施例中，所述异源核酸可以是质粒。

在本公开的此方面的一些实施例中，所述基因表达调控区可以包括基因启动子区。