[发明专利]用于基因疗法的修饰的rAAV衣壳蛋白

权利要求书

1.一种用于治疗或预防关节炎疾病或用于治疗或预防与关节炎疾病相关的症状的包含修饰的衣壳蛋白的重组的腺相关病毒(rAAV)病毒体，其中所述修饰的衣壳蛋白在所述蛋白质的C末端部分中包含氨基酸序列Z，所述氨基酸序列Z的残基暴露在所述衣壳蛋白的表面上。

2.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述氨基酸序列Z：

a.包含下式I的氨基酸残基的序列或由其组成：

y–G–Q–x–G–(x)₃–R–(x)₃–y–A–Q–A–A

其中x表示单个氨基酸残基或其中y表示0、1或2个氨基酸残基，并且

b.存在于与野生型AAV衣壳蛋白的从C末端起第100-200位，优选地第120-180位，更优选地第130-170位，更优选地第140-160位氨基酸残基相对应的位置处。

3.根据权利要求1或权利要求2所述所使用的rAAV病毒体，其中所述序列Z包含在所述修饰的衣壳蛋白中通过下式II表示的位置处：

EEEIxxxxPVATExxGxxxxNxQy–Z–(x)_nLPGMVWQxRDVYLQGPIWAKIPHTDG

a.其中Z、x和y如权利要求1中所定义，并且

b.其中n为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15。

4.根据前述权利要求中任一项所述所使用的rAAV病毒体，其中所述衣壳蛋白包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：

i)与具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:1的第588-602位氨基酸与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性，

ii)与具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:2的第585-599位氨基酸与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性，

iii)与具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:3的第587-601位氨基酸与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性，

iv)与具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:4的第586-600位氨基酸与SEQ ID NO:8具有至少80％序列同一性，

v)与具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:5的第588-602位氨基酸与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性，

vi)与具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:6的第588-602位氨基酸与SEQ ID NO:8具有至少80％序列同一性，以及

vii)与具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列并且其中SEQ ID NO:7的第587-601位氨基酸与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性，

其中当在相同条件下测试时，与具有选自由SEQ ID NO:13-19组成的组的氨基酸序列的未修饰的衣壳蛋白相比，所述修饰的衣壳蛋白提供表达的至少两倍增加，优选地在人FLS细胞中，其中优选地，所述未修饰的衣壳蛋白具有氨基酸序列SEQ ID NO:19或具有与所述修饰的衣壳蛋白相同的血清型。

5.根据前述权利要求中任一项所述所使用的rAAV病毒体，其中所述衣壳蛋白包含选自由SEQ ID NO:1-7组成的组的氨基酸序列或由其组成。

6.根据前述权利要求中任一项所述所使用的rAAV病毒体，其中所述rAAV病毒体包含：

i)包含至少一个AAV反向末端重复(ITR)序列的核苷酸序列，以及

ii)编码目标基因产物的核苷酸序列，其中优选地，编码目标基因产物的所述核苷酸序列位于两个AAV ITR序列之间。