[发明专利]核酸分子及其使用方法

权利要求书

1.一种核酸分子，包括：

a.编码组成型启动子的多核苷酸；

b.编码靶分子或靶蛋白的多核苷酸；

c.任选地编码接头的多核苷酸；

d.任选地编码泛素的多核苷酸；

e.任选地编码所述靶蛋白的约7至约25个氨基酸残基片段的多核苷酸；和

f.编码核定位信号的多核苷酸，

其中，序列可操作地彼此连接，并且所述b)和c)的序列以及所述任选的序列d)和e)可操作地彼此连接，以编码包括全长蛋白的氨基酸序列、任选的所述接头的氨基酸序列、任选的泛素的氨基酸序列和所述靶蛋白的约7至约25个氨基酸残基片段的蛋白。

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，所述核酸分子包括：

a.编码组成型启动子的多核苷酸；

b.编码靶蛋白的多核苷酸；

c.编码接头的多核苷酸；

d.编码泛素的多核苷酸；

e.编码所述靶蛋白的约7至约25个氨基酸残基片段的多核苷酸；和

f.编码核定位信号的多核苷酸。

3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，所述组成型启动子选自由以下组成的组：EF-1、SV40、劳斯肉瘤病毒和梅森-菲舍猴病毒-CTE。

4.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，编码靶蛋白的序列是编码选自由以下组成的组的蛋白的序列：MAGE-A4、MAGE-A2、Gp120、Gag、Nef、Tat、血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、GFP和SEAP。

5.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，编码所述靶蛋白片段的序列是编码选自由以下组成的组的蛋白的片段的序列：MAGE-A4、MAGE-A2、Gp120、Gag、Nef、Tat、血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、GFP和SEAP。

6.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，编码接头的序列编码甘氨酸-丝氨酸接头。

7.根据权利要求6所述的核酸分子，其中，所述甘氨酸接头包括GGGGS、GGGGA、GGSGS或其任何组合的再次重复。

8.根据权利要求6的所述核酸分子，其中，编码所述甘氨酸-丝氨酸接头的序列编码GGGGS、GGGGA和/或GGSGS的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个重复。

9.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，所述泛素是单个泛素蛋白或者2个或更多个泛素蛋白的链。

10.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，编码泛素的序列编码选自由以下组成的组的泛素分子：UBB、UBC、UBA52和RPS27A。

11.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，编码所述靶蛋白的约7至约25个氨基酸片段的序列通过MHCI或MHCIICD8+免疫细胞或T细胞毒性淋巴细胞引发免疫原性应答。

12.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，编码核定位信号的序列是元件1。

13.一种药物组合物，包括权利要求1-11中任一项所述的核酸分子。

14.一种分离的细胞，包括权利要求1-12中任一项所述的核酸分子。

15.一种药物组合物，包括权利要求14所述的细胞。

16.一种在受试者中诱导针对蛋白的免疫应答的方法，所述方法包括将权利要求1-12中任一项所述的核酸序列引入到所述受试者的细胞中或所述受试者中，并且所述核酸序列由所述受试者中的细胞摄取。