[发明专利]用于早期诊断口腔肿瘤的体外筛查方法和试剂盒

说明书

本发明属于口腔肿瘤的早期诊断领域。特别地，本发明涉及用于诊断和/或预测口腔肿瘤发展的风险的方法，该方法包括使用免疫学试验例如ELISA(酶联免疫吸附试验)在细胞提取物中检测口腔肿瘤的某些标志物。本发明还涉及用于诊断和/或预测口腔肿瘤发展的风险的相关试剂盒。

发明领域

本发明属于口腔肿瘤的早期诊断领域。特别地，本发明涉及用于诊断和/或预测口腔肿瘤发展的风险的方法，该方法包括使用免疫学试验例如ELISA(酶联免疫吸附试验)在细胞提取物中检测口腔肿瘤的某些标志物。本发明还涉及用于诊断和/或预测口腔肿瘤发展的风险的相关试剂盒。

现有技术

口腔癌是世界上最常见的10种肿瘤之一，实际上，每年诊断出的新病例超过500000。在头颈区的肿瘤表现中，口腔的恶性肿瘤可能会影响各种组织：口腔，舌，咽，喉和腭粘膜以及腺上皮。80％的口腔癌是鳞状细胞癌(SSC)，因为目前尚无特异性标志物，由于诊断较晚，因此预后5年的死亡率很高。目前，尚不存在用于预防口腔肿瘤的科学可靠的非侵入性筛查方法。

因此，需要提供一种用于早期诊断口腔肿瘤的方法，该方法使得能够基于组织学采样和解剖病理学确认来识别处于发生病理学风险的对象并进行确定性诊断。

发明详述

本发明的目的是提供一种创新的，快速的，经济的，敏感的和非侵入性的试剂盒，可用于早期诊断筛选以鉴定在症状前阶段的赘生形式。具体地，作者着眼于口腔癌的特定标记物的表达，即上皮生长因子受体(EGFR)和类固醇受体，雄激素受体(AR)和雌激素受体(ER)，本发明的试剂盒能评估这些蛋白，特别是通过ELISA试验进行评估。

在本发明的上下文中，EGFR序列优选对应于NCBI数据库中可用的登录号为NM_005228.3的序列或编码的蛋白质序列。

在本发明的上下文中，AR序列优选对应于NCBI数据库中可用的登录号为NM_000044.4的序列或编码的蛋白质序列。

在本发明的上下文中，ER序列优选对应于NCBI数据库中可用的登录号为XP_495993或NP_001428.1的序列或编码核苷酸序列。

因此，本发明提供了一种非侵入性诊断辅助，用于筛查癌前病灶的可能存在，其有助于支持口腔肿瘤的早期诊断，以进行三级预防。实际上，本发明的方法和试剂盒尤其针对患有可能导致细胞转化的炎症的对象。

本发明属于基于免疫学试验的装置领域，优选地，本发明基于通过ELISA对细胞提取物进行的蛋白质分析。

本发明还涉及实现通过组装还可以从市场上购得的半成品来构建的创新产品。该产品包括可用于对潜在危险细胞进行采样的仪器，以及使专业人员(牙医)进行分析并验证生物标志物是否存在，解释测试结果本身所需的一切。该产品具有极其简单的使用方法。

因此，本发明的目的是一种用于预测对象的口腔肿瘤的发展风险和/或其诊断和/或预后和/或监测其进展和/或筛选其治疗的体外方法，包括以下步骤：

a)在从对象，优选从对象的口腔获得的生物样品中至少检测和/或定量雄激素受体(AR)和雌激素受体(ER)；和

b)与对照样品进行比较。

优选地，从对象获得的样品获自对象的口腔，更优选获自口腔，舌，咽，喉和腭粘膜以及腺上皮。优选地，从对象获得的样品是从舌获得的。

在一个优选的实施方式中，在步骤a)中，还检测和/或定量上皮生长因子受体(EGF-R)。

优选地，AR和/或ER和/或EGF-R的存在，和/或AR和/或ER和/或EGF-R相对于对照样品中的量更高的量指示对象处于发展口腔肿瘤的风险中或正患有口腔肿瘤。

优选地，步骤a)包括：