[发明专利]HPV特异性T细胞的产生

权利要求书

1.一种产生或扩增对HPV具有特异性的免疫细胞群的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：通过在呈递HPV抗原肽的抗原呈递细胞(APC)的存在下以及在HLA阴性LCL存在的情况下培养，刺激免疫细胞群，任选的为外周血单核细胞(PBMC)。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述HLA阴性LCL是EBV复制缺陷的。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述抗原呈递细胞是活化的T细胞(ATC)，树突状细胞(DC)或B原始细胞(BB)。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述树突状细胞衍生自从外周血单核细胞(PBMC)群中分离的CD14+细胞。

5.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中，所述树突状细胞通过以下方法从CD14+细胞衍生：在IL-4和GM-CSF的存在下培养所述CD14+细胞以产生未成熟的树突状细胞(iDC)。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述树突状细胞从CD14+细胞衍生的方法进一步包括通过在以下条件下培养来培养所述iDC以产生成熟的树突状细胞：(a)GM-CSF、IL-4、IL-1β、IL-6、TNFα和CD40L；(b)GM-CSF、IL-4、MPLA和IFNγ；(c)GM-CSF、IFNα；或(d)GM-CSF、IL-4、AmpB和IFNγ。

7.根据权利要求3所述的方法，其中，所述树突状细胞通过包括在以下条件下进行培养的方法从未成熟DC(iDC)获得：(a)GM-CSF、IL-4、IL-1β、IL-6、TNFα和CD40L；(b)GM-CSF、IL-4、MPLA和IFNγ；(c)GM-CSF、IFNα；或(d)GM-CSF、IL-4、AmpB和IFNγ。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述刺激的免疫细胞群中的CD45RA+细胞被耗尽。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述刺激是通过在IL-7和IL-15的存在下培养来进行的，任选地，其中IL-15以大于15ng/mL的终浓度存在于所述培养物中。

10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中，所述刺激通过在IL-4，IL-6，IL-7和IL-15存在下的培养来进行。

11.一种产生或扩增对HPV具有特异性的免疫细胞群的方法，其特征在于，包括在存在呈递HPV抗原肽的树突状细胞(DC)的存在下通过培养来刺激免疫细胞群，其中DC来自CD14+细胞,分离自PBMC群。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述树突状细胞衍生自CD14+细胞,通过包括在IL-4和GM-CSF的存在下培养所述CD14+细胞的方法产生未成熟树突状细胞(iDCs)。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述树突状细胞从CD14+细胞衍生的方法进一步包括通过在以下条件下的培养来培养所述iDC以产生成熟的树突状细胞：(a)GM-CSF、IL-4、IL-1β、IL-6、TNFα和CD40L；(b)GM-CSF、IL-4、MPLA和IFNγ；(c)GM-CSF、IFNα；或(d)GM-CSF、IL-4、AmpB和IFNγ。

14.一种产生或扩增对HPV具有特异性的免疫细胞群的方法，其特征在于，包括在呈递HPV抗原肽的树突细胞(DC)存在下通过培养刺激免疫细胞群，其中DC来源于未成熟的DC(iDC)，通过以下方法进行，所述方法包括在以下条件下进行培养：(a)GM-CSF、IL-4、IL-1β、IL-6、TNFα和CD40L；(b)GM-CSF、IL-4、MPLA和IFNγ；(c)GM-CSF、IFNα；或(d)GM-CSF、IL-4、AmpB和IFNγ。