[发明专利]携带CD31的干细胞和祖细胞

说明书

本发明涉及一种由脂肪源性再生细胞(ADRC’s)衍生的分离的CD31⁺细胞，作为药物的用途。本发明还涉及包含此类细胞的组合物。此外，本发明涉及用于筛选脂肪源性再生细胞(ADRC’s)群体的再生能力的方法。

技术领域

本发明涉及特定的分离的脂肪源性再生细胞(ADRCs)，也通常被称为脂肪源性基质血管组分(SVF)。具体地，本发明涉及CD31+ADRC的医学用途。此外，本发明涉及用于筛选ADRC群体的再生能力的方法。

背景技术

脂肪源性再生细胞(ADRCs)是通过脂肪组织获得，最常见的是在吸脂后以脂肪抽吸物的形式获得。ADRC是异质的，包含多种细胞类型，其中包括已显示源自体内血管周围空间的间充质干细胞，因此对血管结构等具有很强的再生能力。它们通过分泌分子(包括促进损伤后修复的激素、生长因子和细胞因子(+非编码小RNA))，产生一种再生的微环境；因此，它还可以在体内作为位点调控的“药店”，而不仅仅是具有血管潜能的干细胞。它们的治疗能力最近才开始被了解，它们可以很容易地沿着不同的谱系路径分化，并在骨骼、软骨、肌肉、血管和其他间充质组织中产生细胞。此外，ADRC能够转分化为外胚层和内胚层谱系，包括内分泌胰腺细胞、肝细胞和各种神经细胞类型。

从细胞移植和宿主的角度来看，ADRC的机理作用还不完全清楚。关于移植的ADRC是通过新细胞移植修复受损组织，还是通过直接的ADRC组织细胞相互作用或间接地通过分泌调节组织细胞的再生分子来发挥短暂的有益作用，目前仍存在争议。这是一个非常重要的问题，似乎取决于ADRC注射进入的组织。也很可能这三种情况同时出现，并且在异质性ADRC群体的不同类型细胞中具有协同作用。ADRC具有巨大的再生潜力，例如移植后勃起功能障碍和淋巴水肿。例如，Haahr等人(EBioMedicine 5(2016)204-210)公开了在根治性前列腺切除术后勃起功能障碍的患者中海绵体内注射自体脂肪源性再生细胞。Haahr等人没有提及CD31和/或CD34阳性的细胞。Toyserkani等人(Stem Cells TranslationalMedicine 2016；5:857-859)公开了使用分离的脂肪源性基质细胞治疗淋巴水肿。Toyserkani等人没有提及CD31和/或CD34阳性的细胞。

WO 2014/138793公开了分离内皮祖细胞(EPCs)的方法。更具体地，公开了用于分离具有自我更新和分化能力的内皮祖细胞的方法。进一步公开了最高的内皮干细胞活性存在于CD31^-细胞中，而CD31⁺细胞仅提供有限的集落形成潜能。

因此，改进的具有再生特性的分离的ADRC群体将是有利的，尤其是，使用此类ADRC的更有效和/或更可靠的治疗方案将是有利的。

发明内容

注射的干细胞悬浮液包含不同细胞类型与可促进再生过程的物质的最佳混合物，这对ADRC在例如勃起功能障碍和淋巴水肿的作用是非常重要的。

ADRC溶液包含相对异质的细胞群体，其由B和T淋巴细胞、内皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、周细胞、前脂肪细胞以及其他细胞组成。在此公开的很重要的是，ADRC悬浮液中应存在CD31和CD34阳性细胞，尤其是CD31阳性细胞。它们是两种标记物，通常用于区分血管细胞和干细胞与其他细胞，如血液和基质细胞。本发明人已经使用流式细胞术激活的细胞分选来分选出CD31⁺/CD34⁺、CD31⁺/CD34^-、CD31^-/CD34^-、CD31^-/CD34⁺的ADRC。注射的ARDC的数量也可能对血管生成、淋巴管生成和临床疗效有重要的作用。

因此，本发明的目的涉及提供具有再生特性的分离的ADRC群体。