[发明专利]生产目标蛋白质的宿主细胞

权利要求书

1.一种经改造以产生异源目标蛋白质(POI)的真核宿主细胞，对所述真核宿主细胞进行基因修饰，以减少至少一种内源宿主细胞蛋白质(HCP)的产生，所述内源宿主细胞蛋白质(HCP)选自由第一HCP(HCP1)、第二HCP(HCP2)和第三HCP(HCP3)组成的组，其中

a)如果宿主细胞是Komagataella phaffii，则HCP1包含被识别为SEQ ID NO:1的氨基酸序列，或者如果是其他物种，则其为宿主细胞内源的同源序列；

b)如果宿主细胞是Komagataella phaffii，则HCP2包含被识别为SEQ ID NO:3的氨基酸序列，或者如果是其他物种，则其为宿主细胞内源的同源序列；以及

c)如果宿主细胞是Komagataella phaffii，则HCP3包含被识别为SEQ ID NO:5的氨基酸序列，或者如果是其他物种，则其为宿主细胞内源的同源序列。

2.根据权利要求1所述宿主细胞，其中所述至少一个HCP是HCP1，并且可选地，是HCP2和/或HCP3。

3.根据权利要求1或2所述宿主细胞，所述宿主细胞被进一步基因修饰，以减少另外的HCP的产生，所述HCP为HCP4，其中

a)如果宿主细胞是Komagataella phaffii，则HCP4包含被识别为SEQ ID NO:7的氨基酸序列，或者如果是其他物种，则其为宿主细胞内源的同源序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述宿主细胞，其中每一个同源序列的特征在于，与相应氨基酸序列具有至少50％的序列同一性。

5.根据权利要求1-4中任一项所述宿主细胞，其中通过宿主细胞基因组的一种或多种基因修饰，对宿主细胞进行基因修饰，所述基因修饰包括中断、取代、缺失或敲除(i)一种或多种内源多核苷酸或其中一部分；或(ii)表达控制序列，优选地，其中所述表达控制序列选自由启动子、核糖体结合位点、转录或翻译起始和终止序列、增强子和激活子序列组成的组。

6.根据权利要求5所述宿主细胞，其中通过所述一种或多种基因修饰，敲除编码所述至少一种HCP中的任一种的基因。

7.根据权利要求1至6中任一项所述宿主细胞，与未经所述修饰的宿主细胞相比，所述宿主细胞被基因修饰，以使得所述至少一种HCP中的任一种的量减少至少50％(mol/mol)，优选地，通过敲除编码所述至少一种HCP中的任一种的基因。

8.根据权利要求1至7中任一项所述宿主细胞，所述宿主细胞包含表达盒，所述表达盒包含与编码所述POI的核苷酸序列可操作地连接的一个或多个调控核酸序列，其中所述一个或多个可操作连接的序列与POI编码序列不是天然地相关。

9.根据权利要求1至8中任一项所述宿主细胞，其中所述POI是肽或蛋白质，所述肽或蛋白质选自由抗原结合蛋白质、治疗性蛋白质、酶、肽、蛋白质抗生素、毒素融合蛋白质、碳水化合物-蛋白质缀合物、结构蛋白质、调控蛋白质、疫苗抗原、生长因子、激素、细胞因子、加工酶，和代谢酶组成的组。

10.根据权利要求1至9中任一项所述宿主细胞，所述宿主细胞是动物细胞、脊椎动物细胞、哺乳动物细胞、人体细胞、植物细胞、线虫细胞、无脊椎动物细胞、昆虫细胞、软体动物细胞、衍生自上述任一种的干细胞，或酵母或真菌细胞。