[发明专利]通过两相流体系统的外来体分离方法在审
申请号: | 201980026098.9 | 申请日: | 2019-02-15 |
公开(公告)号: | CN112136044A | 公开(公告)日: | 2020-12-25 |
发明(设计)人: | F·沙欣;P·N·塔斯利;O·K·科尔巴斯;B·T·博兹库尔特 | 申请(专利权)人: | 耶迪特普大学 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50;C12Q1/24;C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 初明明;黄希贵 |
地址: | 土耳其伊*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 两相 流体 系统 外来 分离 方法 | ||
1.通过两相流体系统的外来体分离方法,其能够从细胞质内和外的流体获得外来体,所述方法包括以下步骤:
a. 制备含有外来体的流体样品,
b. 去除所述流体样品中的污染物,
c. 将所述流体样品与含有PEG和葡聚糖的分离溶液混合,
d. 通过所述两相流体提取系统将形成的用于分离的所述混合物分离成两相,
e. 丢弃分离成两相的所述样品的上清液,以去除其中的蛋白质和其它不需要的物质,
f. 将所述收集的相与洗涤溶液混合,
g. 通过所述两相流体提取系统将形成的用于洗涤的所述混合物分离成两相,
h. 丢弃形成的所述两相的上清液,并收集含有所述外来体的下面的相。
2.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中所述含有外来体的流体样品为极性流体。
3.根据权利要求2所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中所述含有外来体的流体样品为选自以下的流体:细胞培养基、血液、血清、血浆、胎盘液、唾液、尿素、精液、母乳、植物提取物及其混合物。
4.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中过滤方法用于从所述流体样品中去除大的污染物。
5.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中离心方法用于从所述流体样品中去除大的污染物。
6.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中所述分离溶液中PEG的分子量在25,000-45,000之间。
7.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中所述分离溶液中葡聚糖的分子量在450,000-650,000之间。
8.根据权利要求6所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中用于所述分离溶液中的PEG的质量浓度在2%-4%之间。
9.根据权利要求7所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中用于所述分离溶液中的葡聚糖的质量浓度在0.75%-2.80%之间。
10.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中在用于获得外来体的所述两相分离中使用离心方法。
11.根据权利要求10所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中在用于获得外来体的所述两相分离中,所述离心方法在1000 g和5000 g进行。
12.根据权利要求1所述的方法,其中在水中的PEG用作所述洗涤溶液。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述洗涤溶液含有2质量%至4质量%的PEG。
14.根据权利要求12所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中所述洗涤溶液中PEG的分子量在25,000-45,000之间。
15.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中离心方法用于将所述洗涤溶液分离成两个单独的相。
16.根据权利要求1所述的通过两相流体系统的外来体分离方法,其中过滤用于去除用所述洗涤溶液洗涤的所述样品中的微泡。
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