[发明专利]基质金属蛋白酶-1反义寡核苷酸

说明书

一种治疗与人MMP‑1基因转录相关的疾病或状况的方法，包括给对象施用根据权利要求1的肽核酸衍生物。本发明提供了根据权利要求1的肽核酸衍生物，其靶向人MMP‑1前体mRNA“外显子5”的5’剪接位点。本发明的肽核酸衍生物在细胞中强力诱导人MMP‑1 mRNA的剪接变体，且非常可用于治疗与人MMP‑1蛋白相关的皮肤衰老状况或疾病。

技术领域

本发明涉及互补地靶向人基质金属蛋白酶-1前体mRNA(pre-mRNA)以改善由基质金属蛋白酶-1介导的皮肤衰老的肽核酸衍生物。

背景技术

由于衰老的迹象在皮肤中最明显，因此皮肤衰老受到了相当的关注。由于皮肤衰老的预防和治疗对生活质量非常重要，因此已经衰老的人以及年轻人对相关的保健食品、化妆品、药品、医疗用品等都非常感兴趣。有两个主要的皮肤衰老过程。一种是伴随年龄增长的内在或自然衰老，另一种是外在衰老，这是由外源性因素例如阳光暴晒、吸烟和营养不良引起的。

紫外线照射暴露在皮肤上会加速基质金属蛋白酶1(MMP-1)的表达，从而促进胶原蛋白的降解，胶原蛋白是真皮的主要结构成分。此外，吸烟诱导皮肤中基质金属蛋白酶-1mRNA，导致与紫外线照射暴露在皮肤上的结果相同[J.Cosmetic Dermatology vol 6,40-50(2007)]。

胶原蛋白是皮肤、血管、骨骼、牙齿和肌肉等各种结缔组织中细胞外间隙的主要结构蛋白。由于胶原蛋白负责支持大多数组织和细胞结构，因此其降解和变形可能会严重影响皮肤衰老[J.Pathol.vol 211,241-251(2007)]。

基质金属蛋白酶是由成纤维细胞、角质细胞等分泌的酶，其能降解各种细胞外基质(ECM)和基底膜(BM)。已鉴定出26种以上的基质金属蛋白酶，例如MMP-1(间质胶原酶)、MMP-2(明胶酶)、MMP-3(溶基质素)、MMP-7(基质溶素)、MMP-8(嗜中性粒细胞胶原酶)和MMP-12(金属弹性蛋白酶)[J.Biol.Chem.vol 277,451-454(2002)；J.Matrix.Biol.vol 15,519-526(1997)]。

已知由紫外线照射暴露和吸烟引起的活性氧是基质金属蛋白酶-1过表达的原因。从这个意义上说，已开发出抗氧化剂和具有抗氧化作用的功能性食品，例如维生素A(视黄醇)、维生素C(抗坏血酸)、维生素E(生育酚)、类胡萝卜素、类黄酮、绿茶和硒，用于治疗皮肤衰老，关于其作用机制的研究目前正在进行中[Int.J.Food Sci.Technol.vol 73,989-996(2005)；Kor.J.Aesthet.Cosmetol.vol 11,649-654(2013)；Int.J.Mol.Med.vol 38,357-363(2016)]。

考虑到金属蛋白酶-1在皮肤衰老中的重要性，基于金属蛋白酶-1表达的机制开发可改善和预防皮肤衰老状况的药物或化妆品是非常感兴趣和必要的。

前体-mRNA：遗传信息携带在DNA(2-脱氧核糖核酸)上。DNA在细胞核中被转录以产生前体mRNA(前体信使核糖核酸)。哺乳动物前体mRNA通常由外显子和内含子组成，外显子和内含子以下图所示方式相互连接。外显子和内含子的编号如下图所示。

前体mRNA的剪接：通过统称作“剪接”的一系列复杂反应，在内含子缺失后，前体mRNA被加工成mRNA，如下图所示[Ann.Rev.Biochem.72(1),291-336(2003)；NatureRev.Mol.Cell Biol.6(5),386-398(2005)；Nature Rev.Mol.Cell Biol.15(2),108-121(2014)]。