[发明专利]腺病毒纯化方法

权利要求书

1.一种腺病毒纯化方法，其包括下述步骤：a）在阴离子交换树脂上从含腺病毒的细胞培养收获物中捕获腺病毒；b）用浅电导率梯度洗脱所述腺病毒，所述浅电导率梯度在整个梯度上具有15-25%，优选18-20%的递增盐浓度；c）将所述洗脱的腺病毒加入包含多孔壳和多孔核的壳珠树脂中，其中所述核提供有疏水相互作用配体，而所述壳不提供有任何配体；并且d）从所述壳珠树脂洗脱所述腺病毒到流通物中，其中在步骤d）中洗脱的腺病毒包含小于1 ng/ml的宿主细胞蛋白（HCP）。

2.根据权利要求1的方法，其中所述盐选自NaCl、KCl和LiCl，或其任何组合。

3.根据权利要求1或2的方法，其中所述盐是NaCl，并且所述梯度是递增的18-20%，并且所述盐浓度是0-700 mM。

4.根据上述权利要求中一项或多项的方法，其中将所述阴离子交换树脂装在柱中，并且将所述壳珠树脂装在另一个柱中，并且其中将从所述阴离子交换树脂洗脱的所述腺病毒以一定体积加入所述壳珠树脂中，所述体积对应于包含壳珠树脂的柱的15-30个柱体积（CV）。

5.根据权利要求4的方法，其中将从所述阴离子交换树脂洗脱的所述腺病毒以一定体积加入所述壳珠树脂中，所述体积对应于包含壳珠树脂的柱的25-30个柱体积（CV）。

6.根据上述权利要求中一项或多项的方法，其中所述核和壳的孔隙率与所述壳珠树脂相同。

7.根据上述权利要求1-5中一项或多项的方法，其中所述核和壳的孔隙率与所述壳珠树脂不同。

8.一种包含根据权利要求1-7中一项或多项纯化的腺病毒的组合物，其中所述宿主细胞蛋白（HCP）低于1 ng/ml。

9.根据权利要求8的组合物，其中所述腺病毒是适合于细胞疗法的腺病毒载体。