[发明专利]血纤维蛋白原γ初始变体的治疗性用途

说明书

本发明涉及用于治疗或预防感染的用途的包括血纤维蛋白原γ初始变体的组合物。组合物中的血纤维蛋白原γ初始变体包括至少一条血纤维蛋白原γ初始多肽链。根据本发明用途的组合物还可包括其他血纤维蛋白原变体。与WT血纤维蛋白原相比，根据本发明的包括血纤维蛋白原γ初始变体的组合物将感染后的存活时间改善至超过200％。可治疗性地和预防性地使用它们。

技术领域

本发明一般涉及包括γ初始链的血纤维蛋白原变体的用途，特别是涉及它们预防或治疗感染的用途。

背景技术

血纤维蛋白原为可溶性血浆糖蛋白和二聚分子，其由两对通过二硫桥连接的，命名为Aα、Bβ和γ的三条多肽链组成。三条多肽链由三个分开的基因编码并且各自由3个mRNA合成。将三条多肽链(Aα、Bβ和γ)组装成其作为六链二聚体的最终形式(Aα、Bβ、γ)2出现在内质网(ER)的内腔中。循环中人血纤维蛋白原的成熟的主要形式由长度为610个氨基酸的Aα链、461个氨基酸的Bβ链和411个氨基酸的γ链组成，并且称为普通血纤维蛋白原、HMW血纤维蛋白原、野生型(WT)血纤维蛋白原。

然而，已经表明循环血纤维蛋白原为数种变体(其在所有健康的个体的血液中出现并且是Aα链或Bβ链或γ链中改变的结果)的高度异质的混合物。

众所周知的血纤维蛋白原的变体(其为可替换剪接的结果)为血浆血纤维蛋白原γ初始(pFibγ’)变体。pFibγ’变体代表人血浆中总血纤维蛋白原的约10％-15％。在循环中，pFibγ’作为异源二聚体存在，其中二聚血纤维蛋白原分子的一半含有WT血纤维蛋白原中发现的γ链，并且相同血纤维蛋白原分子的另一半含有变体γ链。在人中，pFibγ’中的变体γ链由427个氨基酸(γ427)而不是WT血纤维蛋白原中发现的411个氨基酸(γ411)组成。在γ427链中，γ411链的四羧基-末端氨基酸Ala-Gly-Asp-Val(AGDV)被20-mer肽置换。

除了在控制出血中起关键作用外，血纤维蛋白原可通过限制病原体生长和介导宿主对病原体的防御机制，用作用于宿主保护的早期防线。然而，数种病原体已经进化出与宿主血纤维蛋白原相互作用的方式而增强病原体毒性。例如，金黄色葡萄球菌使用细菌细胞壁-锚定聚丛因子A(ClfA)结合血纤维蛋白原(可能因为其二聚结构)诱导悬浮物中金黄色葡萄球菌的血纤维蛋白原依赖性聚丛。血纤维蛋白原中的ClfA结合位点定位到WT血纤维蛋白原的血纤维蛋白原γ411的羧基-末端。细菌经ClfA和血纤维蛋白原的结合和随后的聚丛被认为是细菌的重要的毒性因素，并且在数个研究中，已经研究了防止ClfA与血纤维蛋白原γ链的结合的效果。美国2011/0171285公开了哺乳动物血纤维蛋白原的体外研究，ClfA不能与所述哺乳动物血纤维蛋白原结合，因为在两条γ链中已经修饰了在羧基-末端AGDV序列之前的谷氨酰胺(Q)。Flick等(2013)Blood(121):1783-1794公开了纯合子转基因小鼠，其中它们的血纤维蛋白原γ链的羧基-末端的QAGDV序列已经缺失(Fibγ^Δ5/Δ5小鼠)。当用金黄色葡萄球菌细菌挑战时，与具有WT血纤维蛋白原的小鼠相比，这些突变体小鼠已经显著增加了存活率。

然而，这些研究使用的分子可等同于从未从血浆中分离的同源二聚体pFibγ’。从血浆中不可能获得足够量的用于医学用途的这种血纤维蛋白原变体。另外，在不存在任何WT血纤维蛋白原的情况下，确定了Fibγ^Δ5/Δ5小鼠中修饰的血纤维蛋白原对细菌结合、聚丛和毒性的效果，并且因此未表明该方法可用作能够与宿主的普通WT血纤维蛋白原竞争并且在存在WT血纤维蛋白原的情况下仍引进临床上有意义的效果的治疗性产品或预防性产品。

相应地，期望找到易于获得，在存在宿主WT血纤维蛋白原的情况下对细菌毒性有作用，并且因此是临床上有意义的可选的血纤维蛋白原组合物。

附图说明

图1根据SEQ ID NO.1的人WT血纤维蛋白原γ链(γ411)的羧基-末端。在位置407-411的Gln-Ala-Gly-Asp-Val(QAGDV)基序加下划线。