[发明专利]修饰免疫细胞以增加活性

说明书

组合物、制备经修饰的免疫细胞(如NK细胞)的方法以及使用经修饰的免疫细胞(如NK细胞)治疗癌症、病毒和微生物感染的方法。所述经修饰的CISH^‑/‑NK细胞对细胞因子如IL‑2和/或IL‑15表现出高度敏感性，并维持扩增和抗肿瘤功能。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年5月11日提交的美国临时申请第62/670,033号的优先权权益，所述申请以引用的方式并入本文中。

政府权益声明

本发明是在基金编号CA217885和CA203348下由美国国立卫生研究院支助进行的。政府拥有本发明的某些权利。

背景技术

天然杀伤(NK)细胞是先天免疫系统的关键部分，并且是淋巴细胞群在抗肿瘤和抗感染免疫方面的重要效应子。然而，肿瘤进展和慢性感染通常会造成NK细胞耗尽，导致效应子功能不佳，并限制NK细胞的抗肿瘤/感染潜力。导致肿瘤和慢性感染中NK细胞耗尽的确切机制尚不清楚。

NK细胞对异常细胞的检测是通过来自配体和细胞因子(如白介素15(IL-15))的激活和抑制信号来控制的。细胞因子诱导型含SH2的蛋白质(CIS)是NK细胞中IL-15信号传导的关键负调控因子，它由人的CISH基因编码。CISH是响应于IL-15而快速诱导的，并且CISH基因的缺失已显示出增加NK细胞对IL-15的敏感性。小鼠的最新研究已经表明，CIS是NK细胞介导的肿瘤免疫的有效抑制检查点。

NK细胞需要细胞因子如白介素2(IL-2)和IL-15来维持活性和功能，但是IL-2会造成全身性毒性。因此，仍然需要用于治疗癌症和其他疾病的临床NK细胞疗法，其无需细胞因子或仅需要低细胞因子剂量即可维持扩增和功能。

发明内容

本公开总体上提供用于在癌症治疗中使用经CISH^-/-修饰的NK细胞的组合物和方法。经修饰的NK细胞表现出对IL-2和/或IL-15刺激的高度敏感性，并且可以通过低浓度细胞因子或生长因子如白介素来维持扩增和抗肿瘤功能。

根据本公开的一个方面，提供了一种经CISH^-/-修饰的NK细胞，其可用作基于NK细胞的疗法的细胞来源，所述基于NK细胞的疗法用于治疗癌症和其他疾病或感染，具有优于未经修饰的天然NK细胞的改进的治疗效果。

根据本公开的一个方面，提供了一种用于制造CISH^-/-NK细胞的方法。

根据本公开的另一方面，提供了一种CISH^-/-NK细胞的细胞培养物，以及包含CISH^-/-NK细胞的药物组合物。

附图说明

将通过参考以下详细描述(其阐述其中利用本公开的原理的说明性实施例)和附图获得对本公开的特征和优点的更好理解，其中：

图1A-图1C描绘了使用常规方法的CISH丧失对NK分化的影响。

图2A-图2B描绘了使用改良方法的CISH丧失对NK分化的影响。

图3A-图3B描绘了CISH^-/-NK细胞扩增。

图4A-图4B描绘了来自incucyte杀伤测定法的结果。

图5A-图5C描绘了CISH^-/-iPSC-NK细胞在细胞因子刺激后显示出较高的单细胞多功能反应。

图6A-图6C描绘了CISH^-/-iPSC-NK细胞显示出增加的基础糖酵解和糖酵解能力。