[发明专利]获得源自胸腺组织的调节性T细胞的方法及所述细胞作为细胞免疫疗法在免疫系统失调中的用途

说明书

本发明提供了一种从胸腺组织获得和纯化调节性T细胞(或thyTreg细胞)的体外方法，这使得从单个胸腺获得超过100亿个细胞成为可能。除了从临床角度来看是安全的以外，本发明中获得的这些thyTreg具有超过95％的纯度和非常高的抑制能力、存活率和活力。前述内容将不需要使用大量离体细胞扩增方案。将这些thyTreg细胞转移至患者能够诱导免疫耐受。因此，所述细胞可以用作细胞疗法以在治疗和/或预防移植排斥和自身免疫疾病中诱导免疫耐受。

技术领域

本发明属于临床免疫学和细胞免疫疗法的领域，特别是属于用于获得和纯化调节性T细胞(Treg)的方案，该调节性T细胞可随后在细胞疗法中被转移到患者中用于例如在移植个体或经受自身免疫过程者中诱导免疫耐受的目的。

背景技术

长期归因于免疫系统的主要功能是保护生物体免受病原体侵害的功能。然而，现在我们知道免疫系统还负责消除肿瘤细胞和预防癌症的发展，并且其还可以引起由于出现自身免疫过程、过敏或移植排斥而导致的反应不足。免疫系统的正常功能只有在存在对正常功能来说充足的平衡或体内平衡时才有可能，如此，过度反应将引起诸如过敏或排斥反应的病理状态，而反应缺乏则将导致感染和癌症的进展。

近年来，我们已经目睹了革命性的使用免疫细胞的细胞疗法出现在癌症治疗中，该疗法试图诱导或恢复对肿瘤的特异性免疫反应，并修补造成这些病理的患者免疫缺陷。对患者的免疫细胞进行遗传修饰以便以特定方式攻击肿瘤的“CAR T细胞”技术就是这种情况。像Novartis或Gilead这样的公司已经开发出这种细胞疗法来治疗B型白血病，实现了约80％的缓解，并且该疗法最近已获得FDA和EMA的批准，这代表着癌症治疗的真正的革命(Maude S.L.,et al.,2014,N Engl J Med.,371(16):1507-17；Lee D.W.,et al.,2015,Lancet,385(9967):517-528)。

然而，在相反意义上，尚未开发出具有相似效果，即诱导免疫耐受以预防或治愈自身免疫疾病或同种异体移植物排斥的细胞疗法。尚未开发出明显成功地减少过度免疫反应并恢复免疫耐受的免疫疗法。当前，使用免疫抑制药来治疗自身免疫疾病和免疫排斥。自从20世纪60年代出现这些药以来，移植实践变得可行，但是，尽管这些药有所改进，它们仍不能为排斥反应提供明确的解决方案，并且持续引起副作用，该副作用是患者的临床演变中的决定因素。具体来说，长期的免疫抑制引起慢性毒性，所述慢性毒性除了显著影响患者的生活质量外，还影响治疗的完成、患者和移植物的总体成功率以及存活。由于大多数免疫抑制剂以非选择性方式起作用，因此整个系统被阻抑和/或失去控制，从而丧失了其保卫宿主抵抗感染或肿瘤细胞繁殖的能力或产生了引起移植器官衰竭的血管损伤。此外，在儿童时期，持续施用免疫抑制剂可能会干扰正常发育，并干扰该时期中发生的免疫系统的适当成熟，这可能在改变患者的免疫能力方面导致终生后果。这些免疫抑制药将来可能会继续改善，从而进一步降低排斥率；然而，这种策略的弊端常常是引起免疫系统的退化和慢性损伤。即使能够更好地预防移植物排斥，与免疫系统的退化有关的病症(如感染、癌症和自身免疫疾病)也将继续限制接受免疫抑制药的移植患者的长期存活。

为此，实现将无限期地避免影响上百万人的排斥或自身免疫疾病的免疫耐受已成为现代医学的主要挑战。

科学界当前的观点是，只有一种涉及再训练(re-educating)移植受者的免疫反应的免疫耐受诱导会允许移植物无限期存活或预防和治愈自身免疫过程。这种耐受诱导会使耐受移植器官成为可能而无需药理学免疫抑制，从而消除了这些疗法的毒性作用及其对免疫系统的损伤作用。