[发明专利]突变体脂肪酶及其用途

权利要求书

1.一种具有脂肪酶活性的多肽，其中所述多肽选自：

a)在与根据SEQ ID NO:1的多肽比对时至少包含氨基酸取代G414X的多肽，其中参考SEQ ID NO:1或相应位置定义一个或多个氨基酸位置的编号；

b)根据a)的多肽，其中所述多肽具有与SEQ ID NO:1的氨基序列至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％％或99％的同一性；

c)由具有与SEQ ID NO:2的核苷酸序列至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％的同一性的核酸编码的多肽，其中SEQ ID NO:2包含至少一个突变，所述至少一个突变至少导致根据SEQ ID NO:1的多肽或相应位置的所述氨基酸取代G414X，其中参考SEQ ID NO:1定义一个或多个氨基酸位置的编号；和

d)由包含在低、中和/或高严格度条件下与SEQ ID NO:2的序列的互补链杂交的序列的核酸编码的多肽，其中SEQ ID NO:2包含至少一个突变，所述至少一个突变至少导致根据SEQ ID NO:1的多肽或相应位置的所述氨基酸取代G414X，其中参考SEQ ID NO:1定义一个或多个氨基酸位置的编号。

2.根据权利要求1所述的多肽，其中X表示选自A、S、T和V的氨基酸。

3.根据权利要求1或2所述的多肽，其进一步包含选自I100V、S450A、L413M、L410F、S365A、S365Q、Y361W、F362L、和V409A的一个或多个氨基酸取代。

4.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，所述多肽是根据前述权利要求中任一项所述的多肽的分离的、基本上纯的、纯的、重组的、合成的或变体的多肽。

5.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，其中所述多肽具有比相应的野生型多肽的相对于针对二十碳五烯酸酯(EPA)的特异性的针对肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯和硬脂酸酯的特异性高的相对于针对二十碳五烯酸酯的特异性的针对肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯和硬脂酸酯的特异性，和/或其中所述多肽具有比相应的野生型多肽的相对于针对油酸酯和/或亚油酸酯的特异性的针对棕榈酸酯的特异性高的相对于针对油酸酯和/或亚油酸酯的特异性的针对棕榈酸酯的特异性。

6.一种组合物，其包含根据权利要求1至5中任一项所述的多肽。

7.一种核酸，其编码根据权利要求1或5所述的多肽。

8.根据权利要求7所述的核酸，其中所述核酸具有与SEQ ID NO:2至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、或99％的序列同一性，其中SEQ ID NO:2包含至少一个突变，所述至少一个突变导致根据SEQ ID NO:1的多肽的所述氨基酸取代G414X和任选地选自I100V、S450A、L413M、L410F、S365A、S365Q、Y361W、F362L、和V409A的一个或多个氨基酸取代，其中参考SEQ ID NO:1定义一个或多个氨基酸位置的编号。

9.一种表达载体，其包含根据权利要求7或8所述的核酸，所述核酸可操作地连接至指导所述多肽在宿主细胞中表达的至少一个控制序列。

10.一种重组宿主细胞，其包含根据权利要求7或8所述的核酸或根据权利要求9所述的表达载体。

11.一种用于制备根据权利要求1至5所述的多肽的方法，其包括在允许表达所述多肽的条件下在合适的发酵培养基中培育根据权利要求10所述的宿主细胞，并且任选地回收所述多肽。

12.一种用于制备包含油或脂肪的产品的方法，其包括使包含油或脂肪的所述产品的中间形式与根据权利要求1至5中任一项所述的多肽或根据权利要求4所述的组合物接触，并且制备所述产品。