[发明专利]突变体脂肪酶及其用途

说明书

本发明涉及一种具有脂肪酶活性的多肽，其中所述多肽在与根据SEQ ID NO:1的多肽比对时至少包含氨基酸取代G414X，其中参考SEQ ID NO:1定义一个或多个氨基酸位置的编码。本发明进一步涉及一种用于制备包含油或脂肪的产品的方法，其包括使包含油或脂肪的所述产品的中间形式与如本文公开的多肽接触，以及如本文公开的多肽用于油或脂肪中的饱和脂肪酸的用途。

本发明涉及一种具有脂肪酶活性的重组多肽、一种包含所述多肽的组合物、一种编码具有脂肪酶活性的多肽的核酸、一种包含所述编码具有脂肪酶活性的多肽的核酸的表达载体、一种包含所述表达载体的重组宿主细胞、一种用于制备具有脂肪酶活性的重组多肽的方法和一种用于制备食品或饲料产品的方法，其中使用所述脂肪酶。

背景技术

鱼油是长链(LC)多不饱和ω-3脂肪酸、特别是二十碳五烯酸(EPA；C20:5)和二十二碳六烯酸(DHA；C22:6)的有价值来源。已显示这些LCω-3脂肪酸有助于健康的生活方式，并且已显示在过去的几十年中，人类对鱼油的消费有所增加。然而，鱼油不仅含有健康的LC-ω-3脂肪酸。鱼油的一部分由不太健康的饱和脂肪酸诸如棕榈酸(C16:0)组成。因此，已经开发出各种方法来增加EPA和DHA相对于棕榈酸的浓度。

类似地，豆油是亚油酸和油酸的有价值来源。然而，豆油也含有不太健康的饱和脂肪酸，诸如棕榈酸。

US2016/0229785例如公开了一种用于从粗鱼油中直接提取富含ω-3脂肪酸的甘油三酯产品的连续方法，其中将鱼油与溶剂混合并且通过极性相模拟移动床吸附区。此方法的缺点是在提取过程中施用溶剂。

CN105349587A公开了一种用于通过使冷冻干燥的米曲霉(Aspergillus oryzae)菌株与作为底物的鱼油和乙酯鱼油接触来改进甘油酯类鱼油中EPA和DHA含量的方法，其中通过米曲霉脂肪酶催化酯交换。

可替代地，使用脂肪酶来增加鱼油中EPA和DHA的浓度。Fernandez-Lorent等人(2011)J.Am Oil Chem Soc 88:1173-1178公开了用于固定化脂肪酶的不同疏水性支持物对脂肪酶释放ω-3脂肪酸的影响。

脂肪酶(三酰基甘油酰基水解酶，EC 3.1.1.3)是作用于羧酸的水解酶家族的一部分。脂肪酶可以由各种微生物产生。皱褶假丝酵母(Candida rugosa)脂肪酶在工业上广泛使用，并且已经鉴定出五种不同的脂肪酶氨基酸序列。Schmitt等人(2002),ProteinEngineering,第15卷,第7期,第595-601公开了具有不同底物特异性的若干种皱褶假丝酵母脂肪酶突变体。

本发明涉及一种脂肪酶，所述脂肪酶可以降低产品中饱和脂肪酸(诸如棕榈酸)的含量。

发明内容

本文公开了一种具有脂肪酶活性的多肽，其中所述多肽选自：

a)在与根据SEQ ID NO:1的多肽比对时至少包含氨基酸取代G414X的多肽，其中参考SEQ ID NO:1或相应位置定义一个或多个氨基酸位置的编号；

b)根据a)的多肽，其中所述多肽具有与SEQ ID NO:1的氨基序列至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％％或99％的同一性；

c)由具有与SEQ ID NO:2的核苷酸序列至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％的同一性的核酸编码的多肽，其中SEQ ID NO:2包含至少一个突变，所述至少一个突变至少导致根据SEQ ID NO:1的多肽或相应位置的所述氨基酸取代G414X，其中参考SEQ ID NO:1定义一个或多个氨基酸位置的编号；和