[发明专利]用于合成含精氨酸的肽的方法

说明书

提供了用于合成含精氨酸肽的方法。所述方法包括脱保护步骤，该脱保护步骤使来自裂解的基于磺酰基的侧链保护基的副产物从精氨酸到携带富电子侧链的氨基酸的转移最小化。

技术领域

提供了用于合成含精氨酸的肽的方法。新颖的方法包括脱保护步骤，该脱保护步骤使来自裂解的基于磺酰基的侧链保护基的副产物从精氨酸到携带富电子侧链的氨基酸的转移最小化。

背景技术

肽和用来合成肽的氨基酸往往具有反应性侧基。在肽的侧基处的不希望的反应产生不需要的副产物，有时具有相当大的量。从实践角度来看，这些副产物和反应可严重地损害产量或者甚至破坏正在合成的产物。为了使这些副反应最小化，因此常规做法是适当地掩蔽反应物的反应性侧基以帮助确保所期望的反应发生。在肽合成完成之后，然而，这些侧链保护基必须是可定量去除的，以免负面地影响肽质量或产量。

为了将精氨酸并入到肽中，通常使用甲氧基三甲基苯磺酰基-(Mtr)、2,2,5,7,8-五甲基-苯并吡喃-6-磺酰基-(Pmc-)或2,2,4,6,7-五甲基-二氢苯并呋喃-5-磺酰基-(Pbf-)保护的精氨酸。然而，已证明了如果最终肽还包含携带富电子侧链的氨基酸，诸如组氨酸和/或色氨酸，则来自精氨酸的裂解基于磺酰基的侧链保护基容易与其他残留物的富电子侧链起反应，从而导致大量有害的副产物。此外，以上提及的保护基的使用需要延长脱保护时间或更苛刻的最终脱保护条件，这也可能对肽的质量和/或产量产生负面影响。

为了避免与精氨酸侧链保护基相关联的问题，侧链未保护的、α氨基保护的精氨酸也可用于在肽合成中使用。然而，如以上所讨论的，在侧链基处的不希望的反应产生不合需要的副产物。在精氨酸的情况下，三官能胍基侧链是强亲核性的并且在其中任何一个侧链未保护的精氨酸在溶液中游离(未与新生肽偶联)或者与新生肽偶联的条件下可以为反应性的。因此，通常仍然优选使用侧链保护的精氨酸。

因此，持续需要一种用于在还包含携带富电子侧链的氨基酸的肽中使精氨酸的侧链保护基脱保护的高效且改进的方法。

令人惊讶地，人们现在已发现，制备包含侧链保护的精氨酸和携带富电子侧链的氨基酸的肽的某些预分散体、然后将所述预分散体与能够裂解Mtr-、Pmc-或Pbf-的酸混合显著地减少了副产物的形成。

发明内容

因此，在第一实施方式中本发明涉及一种用于使包含Mtr-、Pmc-或Pbf-侧链保护的精氨酸和至少携带富电子芳族侧链的氨基酸的肽脱保护的方法，所述方法包括以下步骤：

a.)将肽增溶在以下项的混合物(在本文中也称为溶剂混合物)中：至少一种非质子有机溶剂、硫醇清除剂和要么质子溶剂要么不能够去除精氨酸保护基的酸或它们的混合物，然后

b.)将步骤a.)中获得的溶液与不能够去除精氨酸保护基的酸和能够去除精氨酸保护基的酸的混合物(在本文中也称为裂解混合物)混合，附带条件是步骤a.)和b.)中使用的不能够去除精氨酸保护基的酸的总量(按摩尔计)高于能够去除精氨酸保护基的酸的量。

应很好地理解，本发明包含肽作为光学纯异构体，诸如例如作为纯对映异构体或立体异构体，以及不同异构体的混合物，诸如例如作为外消旋体或非对映异构体的混合物。

如本文所使用的氨基酸的术语“侧链”通常是指氨基酸的附着到相应的氨基酸的公共主链的那个部分。例如，丝氨酸的侧链是-CH₂-OH，而丙氨酸的侧链是-CH₃。

术语“不能够去除精氨酸保护基的酸”是指不能够在如在下面概述并在实施例中图示的给定反应条件下定量地去除(即多达95-100％)精氨酸保护基的酸(诸如特别是三氟乙酸、乙酸或甲酸)。

术语“能够去除精氨酸保护基的酸”是指能够在如如在下面概述并在实施例中图示的给定反应条件下定量地去除精氨酸保护基的酸(诸如特别是甲烷磺酸)。