[发明专利]抗体的分离方法和疾病的检查方法

说明书

课题在于，提供检测被检者有无疾病、疾病的发病风险、疾病的进展程度、和/或衰老的进展程度的方法。通过包括下述工序(a)～(c)的方法来解决课题：(a)向填充有固定有Fc结合性蛋白质的不溶性载体的柱中添加含有由被检者得到的抗体的溶液，使该抗体吸附于该载体的工序；(b)使用洗脱液洗脱吸附于上述载体的抗体，得到抗体的分离图谱的相关数据的工序；(c)以上述数据为指标，检测上述被检者有无疾病、疾病的发病风险、疾病的进展程度、和/或衰老的进展程度的工序。

技术领域

本发明涉及抗体的分离方法及其应用。具体而言，本发明例如涉及以分离由被检者得到的抗体时的分离图谱的特征为指标来检测被检者有无疾病、疾病的发病风险、疾病的进展程度、和/或衰老的进展程度的方法。

背景技术

近年来，在癌症、免疫疾病等的治疗中使用含有抗体的药品(抗体药品)。用作抗体药品的抗体可通过基因工程学方法得到，可在培养能够表达该抗体的细胞(例如，中华仓鼠卵巢(CHO)细胞等)之后使用柱色谱等纯化至高纯度而制造。但是，近年的研究表明，由此而制造的抗体由于受到氧化、还原、异构化、糖链添加等修饰而成为多种分子的集合体，这对药效和安全性的影响令人担忧。特别地，据报道结合在抗体上的糖链结构会对抗体药品的活性、动力学和安全性造成较大影响，需要详细地分析糖链结构(非专利文献1)。另外，对于风湿病等疾病而言，添加到血液中的抗体上的糖链结构的变化是已知的(非专利文献2和3)，有可能可以通过分析添加到抗体上的糖链结构来诊断疾病。

作为分析用于抗体药物的抗体的糖链结构的方法，主要实施的是包括切断糖链的LC-MS分析(专利文献1和专利文献2)。但是，上述分析方法伴随着非常复杂的操作，需要非常多的时间。作为相对简便的抗体分子结构的分析方法，可列举利用色谱的分析。具体而言，通过使用凝胶过滤色谱将抗体基于分子量而分离，从而能够对聚集体和分解物进行分离和定量。另外，可以利用离子交换色谱对抗体分子所具有的电荷的差异进行分离。但是，上述的利用色谱的分析无法识别糖链结构等抗体分子的微小的结构变化，因此得到的分析结果有局限。

另一方面，报道了利用基于固定于不溶性载体的亲和配体与抗体的亲和性的分析能够对抗体的性能进行测定、判断(专利文献3)。但是，尚未进行过根据糖链结构的差异来分离抗体、特别是根据糖链结构的差异来分离人源抗体。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本特开2016-194500号公报

专利文献2:日本特开2016-099304号公报

专利文献3:WO2013/120929号公报

非专利文献

非专利文献1:CHROMATOGRAPHY，34(2)，83-88(2013)

非专利文献2:Science、320、373(2008)

非专利文献3:Nature Communication、7、11205(2016)

发明内容

发明要解决的问题

本发明的课题在于，提供抗体的分离方法。本发明的一方式中，课题在于提供检测被检者有无疾病、疾病的发病风险、疾病的进展程度、和/或衰老的进展程度的方法。

用于解决问题的方案

本发明人们为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，利用Fc结合性蛋白质则可以基于糖链结构的差异来分离抗体、以及以利用Fc结合性蛋白质分离由被检者得到的抗体时的分离图谱的特征为指标可以检测被检者有无疾病、疾病的发病风险、疾病的进展程度、和/或衰老的进展程度，从而完成了本发明。