[发明专利]培养上清液制剂的制造方法在审

专利信息
申请号: 201980041197.4 申请日: 2019-08-02
公开(公告)号: CN112334144A 公开(公告)日: 2021-02-05
发明(设计)人: 井上肇;藤田千春 申请(专利权)人: 株式会社细胞应用技术研究所
主分类号: A61K35/28 分类号: A61K35/28;A61K35/36;A23L33/10;A61K8/99;A61K9/08;A61K9/10;A61K47/02;C12N5/077;C12N5/0775;C12N5/071;A61Q19/00;A61P19/02;A61P29/00;A61P9/10
代理公司: 北京华夏博通专利事务所(普通合伙) 11264 代理人: 刘俊;高珊
地址: 日本神奈川县川崎市川崎*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 培养 上清液 制剂 制造 方法
【说明书】:

本发明的课题是提供一种生物相容性优异且大量包含特定基因或蛋白质的培养上清液制剂。本发明的解决方案是一种培养上清液制剂的制造方法,包含:第1培养工序,使用第1培养基将细胞培养至汇合为止;第2培养工序,在第1培养工序之后,使用不同于第1培养基的第2培养基作为培养基,并且培养所述细胞;及培养上清液制剂取得工序,在第2培养工序之后,获得包含第2培养基的培养上清液制剂,第2培养基包含钙离子及缓冲剂。

技术领域

本发明是涉及培养上清液制剂的制造方法等。若具体说明,则是涉及使用能用于注射或点滴的输液等电解质溶液,且使用培养细胞所得的培养上清液,并且细胞培养用的培养基的混入少的培养上清液制剂的制造方法。

背景技术

培养上清液包含在培养细胞时由细胞所分泌的物质(分泌物)。因此,培养上清液所含的各种疾病的治疗或预防用的组合物(培养上清液制剂)被认为对各式各样的疾病等的改善是有效的。例如,日本特许第6296622号公报中记载一种包含培养上清液的损伤部治疗用组合物的制造方法。日本特许第6152205号公报中记载一种含有培养上清液的抗过敏治疗用组合物。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本特许第6296622号公报

专利文献2:日本特许第6152205号公报

发明内容

发明所欲解决的课题

另一方面,此等培养上清液制剂包含最终培养工序的培养基。在培养基的种类中,也有无血清培养基或无动物培养基等已减少人类以外生物来源的成分的培养基。但是,培养基本身是依据培养细胞的目的而被调整。因此,在对活体内给予培养上清液的情形,有引起各式各样的问题的可能性。于是,本发明的目的是提供一种生物相容性优异的培养上清液制剂。并且,培养基是将培养细胞作为主要目的,并不是将一定要对患者给予细胞上清液作为目的。因此,本发明的优选例的目的是提供一种包含大量特定的基因或蛋白质的培养上清液制剂。

解决课题的技术方案

本发明基本上是基于下述见解:通过将最终培养阶段的培养基作为能用于注射剂或点滴等的输液等电解质溶液,而可获得生物相容性优异的培养上清液制剂。并且,如同由后述的实施例所实证,是基于下述见解:相较于一般的细胞培养用培养基,使用输液的培养基会在培养上清液中包含大量的某种基因或蛋白质,而有各种治疗、预防、改善效果也高的情形。

本说明书所公开的最初发明是涉及培养上清液制剂的制造方法。

此方法包含第1培养工序、第2培养工序及培养上清液制剂取得工序。

第1培养工序是使用第1培养基将细胞培养至汇合为止的工序。细胞优选为脂肪组织来源间充质间质细胞,表皮来源上皮系细胞或牙髓来源间充质干细胞。

第2培养工序是在第1培养工序之后将不同于第1培养基的第2培养基作为培养基并且培养细胞的工序。

第2培养基是包含钙离子及缓冲剂的电解质溶液。第2培养基可以是注射用的输液或点滴用的输液。第2培养工序优选为不使用CO2培养器且不进行CO2培养的工序。第2培养工序优选为将细胞培养5小时以上且5天以下的工序。第2培养基优选为进一步包含前列腺素的培养基。

培养上清液制剂取得工序是在第2培养工序之后获得包含第2培养基的培养上清液制剂的工序。培养上清液制剂优选为包含50重量%以上且100重量%以下的第2培养工序后的第2培养基。培养上清液制剂取得工序优选为包含添加海藻糖的工序。

上述方法优选为进一步包含:培养上清液回收工序,在第2培养工序之后回收培养上清液;及冷冻工序,将培养上清液回收工序所回收的培养上清液进行冷冻。优选为培养上清液制剂是化妆品、医药品、食品或饮料的原料。

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