[发明专利]联合基因治疗

权利要求书

1.一种联合治疗，其包含(i)病毒载体，其包含编码目的蛋白的转基因；和(ii)基于EV的载体，其包含mRNA、环状RNA(circRNA)、小环和/或质粒DNA(pDNA)形式的所述转基因。

2.根据权利要求1所述的联合治疗，其中所述转基因最初使用所述病毒载体施用，并且随后使用所述基于EV的载体施用。

3.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其中所述转基因使用所述病毒载体以第一剂量施用，并且使用所述基于EV的载体以第二(以及任选地后续)剂量施用。

4.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其中所述转基因编码肽和/或多肽。

5.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其中所述病毒载体是逆转录病毒、水泡性口炎病毒、腺病毒、腺相关病毒、慢病毒、单纯疱疹病毒、柯萨奇病毒或任何其他类型的天然或重组病毒。

6.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其中所述基于EV的载体是细胞外囊泡、外泌体和/或微泡。

7.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其中所述基于EV的载体被外源或内源修饰以含有所述转基因。

8.根据权利要求7所述的联合治疗，其中所述基于EV的载体被修饰为包含融合蛋白，所述融合蛋白包含EV蛋白和核酸(NA)结合蛋白，其中所述NA结合蛋白与所述mRNA、circRNA、小环和/或pDNA转基因相互作用并将它们装载到所述基于EV的载体中。

9.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其用于药物中。

10.根据前述权利要求中任一项所述的联合治疗，其用于治疗遗传性疾病。

11.根据权利要求10所述的联合治疗，其中所述遗传性疾病选自包含以下的群组：溶酶体贮积病、遗传性代谢错误、肌病、过氧化物酶体异常、线粒体疾病、神经和神经退行性疾病、炎性疾病和癌症。

12.一种制备根据权利要求1-11中任一项所述的联合治疗的方法，其包含以下步骤：

(a)用包含转基因的病毒载体基因组感染第一宿主细胞，并收集由所述第一宿主细胞产生的病毒载体；和

(b)遗传修饰第二宿主细胞以产生包含mRNA、circRNA、小环和/或pDNA多核苷酸中的所述转基因的基于EV的载体，并收集由第二宿主细胞产生的基于EV的载体，其中步骤(a)和(b)可以以任何顺序或平行顺序进行。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述第一宿主细胞和所述第二宿主细胞细胞类型相同。

14.根据权利要求12-13中任一项所述的方法，其中步骤(b)中的所述遗传修饰包含在所述第二宿主细胞中表达包含EV蛋白和NA结合蛋白的融合蛋白，其中所述NA结合蛋白与所述mRNA、circRNA、小环DNA和/或pDNA转基因相互作用并将它们装载到所述基于EV的载体中。

15.根据权利要求12-14中任一项所述的方法，其还包含将所述病毒载体和所述基于EV的载体配制在一种或多种药物组合物中的步骤。