[发明专利]联合基因治疗

说明书

本发明涉及基因治疗的施用，特别是开发用于尤其是单基因疾病中的基因递送的有效组合策略。更具体地，本发明涉及联合治疗、产生该联合治疗的方法以及各种相关实施方案。

技术领域

本发明涉及基因治疗的施用，特别是开发用于尤其是单基因疾病中的基因递送的有效组合策略。

背景技术

基因治疗旨在矫正作为疾病发展基础的缺陷基因。解决这一问题的常用方法涉及将正常基因递送至细胞核。然后，可将这一基因插入靶细胞的基因组中或可保持为游离基因。可以通过多种方法(包括使用病毒载体)将矫正基因递送至受试者的靶细胞。近年来，已经开发了基于不同类型的病毒(例如，逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒、慢病毒等)的多种重组基因转移载体，并经临床试验对其进行了测试。由于诸如转导不同组织的不同类型的分裂细胞和非分裂细胞的能力以及建立稳定长期的转基因表达的能力的特性，基于腺相关病毒(AAV)的基因转移载体已成为受青睐的载体。

所有病毒载体用于基因递送均有若干缺点：(1)任何类型的载体均无法有效地转导大量临床相关的细胞类型和组织，(2)由于先前暴露于野生型病毒，相当大比例的患者对多种病毒载体已存在抗体(即，是血清反应阳性的)，导致病毒介导的转导消除或显著减少，(3)已经报道了针对大多数(即使不是所有)的病毒载体，甚至针对AAV，会诱导体液、先天和细胞免疫反应(Calcedo et al.,Hum Gene Ther Methods,2018)，(4)在病理是完全或部分缺乏特定蛋白质的疾病中，转基因产物的表达可能触发针对治疗性蛋白质自身或针对用病毒载体转导的细胞的T细胞介导的免疫反应(HollingerChamberlain,Curr Opin Neurol,2018；Sherman et al.,Front Immunol,2017)，(5)病毒介导的特定转基因产物的表达是不可控的并且通常难以预测，这可能导致基因表达水平过高，造成毒性，或者过低，造成缺乏治疗活性，以及最后(6)由于在生长器官中的DNA稀释，游离基因表达(例如，作为AAV介导的基因治疗的结果)随着时间自动降低，而这对于特别是儿科单基因疾病是相当大的问题。

因此，尽管基因治疗代表了治疗单基因疾病的非常易驾驭的方法，但是该技术严重受限于不能安全和有效地多次施用病毒载体。已经开发出多种方法来使得能够重复施用病毒载体并且避免针对转基因自身的免疫反应，包括免疫抑制治疗方案(Sherman et al.,Front Immunol,2017；Unzu et al.,J Trans Med,2012)，开发了患者非血清阳性的嵌合病毒血清型，以及在免疫系统发育时的羊膜内基因递送(Hayashita-Kinoh et al.,MolTher,2015)。然而，对于任何基因治疗应用，特别是对遗传性无效病症，重复施用病毒基因治疗仍然是相当大的挑战。

发明内容

因此，本发明的目的是克服与施用基因治疗有关的上述问题，特别是转基因多核苷酸的重复给药以及触发针对转基因和/或载体自身的免疫反应的问题。更进一步地，本发明旨在满足本领域内的其他现有需求，例如开发用于基因治疗的安全有效的治疗策略，作为可行的长期治疗范例，即使在对病毒载体具有显著免疫反应性的情况下。