[发明专利]白介素12融合蛋白及其组合物和治疗方法

说明书

本发明提供了可用于治疗各种不同疾病和障碍(例如增生、实体肿瘤或造血系统恶性肿瘤)的新的白介素12的融合蛋白及其前体药物、组合物和制备方法。

优先权声明和相关申请

本申请要求2018年4月25日提交的中国申请号201810376920.1的利益，所述申请的全部内容为所有目的通过参考并入本文。

技术领域

本发明总的来说涉及新的融合蛋白及其治疗用途。更具体来说，本发明提供了可用于治疗各种不同疾病和障碍(例如增生、实体肿瘤或造血系统恶性肿瘤)的白介素12的新的融合蛋白及其前体药物、组合物和制备方法。

背景技术

白介素-12(IL12)，也被称为细胞毒性淋巴细胞成熟因子(CLMF)，在1989年首次被鉴定为一种自然杀伤(NK)细胞刺激因子，对外周血淋巴细胞具有多种生物活性。IL12由免疫系统的各种不同细胞包括吞噬细胞、B细胞和活化的树突状细胞对感染做出响应而产生(Colombo等，2002CytokineGrowth Factor Reviews 13:155-168)。IL12在介导免疫系统的先天性和适应性臂的相互作用、作用于T细胞和自然杀伤(NK)细胞、增强细胞毒性淋巴细胞的增殖和活性以及其他炎性细胞因子特别是尤其是干扰素-γ的产生中发挥必不可少的作用。

IL12是一种异源二聚体分子，由通过二硫桥共价连接的α链(p35亚基)和β链(p40亚基)组成，形成具有生物活性的74kDa的异源二聚体。在人类和小鼠中，IL12被显示是自然杀伤(NK)细胞活性的强效激活剂(Kobayashi等，1989J.Exp.Med.170:827-845)和来自于NK和T淋巴细胞的IFN-γ的主要诱导物(Chan等，1991J.Exp.Med.173:869-879)，所述IFN-γ是一种具有重要的免疫细胞激活能力的细胞因子。IFN-γ也是归因于IL12的抗血管生成效应的必需介导物(Voest等，1995J.Natl Cancer Inst.87:581-586；Majewski等，1996J.Invest.Dermatol.106:1114-1118)。

研究显示，IL12增强由通过抗肿瘤抗体特异性针对肿瘤靶的免疫细胞所介导的肿瘤细胞杀伤(抗体依赖性细胞毒性，ADCC)(Lieberman等，1991J.Surg.Res.50:410-415)。IL12在体内刺激一氧化氮产生，在小鼠中引起肿瘤进展延迟(Wigginton等，1996CancerRes.56:1131-1136)。也已证明，随着肿瘤负荷增加，内源IL12的产生逐渐减少(Handel-Fernandez等，1997J.Immunol.158:280-286)，从而为向癌症患者提供IL12以重建细胞介导的抗肿瘤应答提供了理论依据。

也已报道IL12是肿瘤驱动的血管生成的有效抑制剂(Voest等，1995同上；Majewski等，1996同上)，证实了在小鼠中由IFN-γ诱导性蛋白-10(IP-10)介导的肿瘤血管形成的显著体内抑制(Sgadari等，1996Blood 87:3877-3882)，所述IP-10是一种对生长中的肿瘤的血管系统具有强力抗血管生成效应的趋化因子(Angiolillo等，1996Ann NYAcad.Sci.795:158-167；Arenberg等，1996J.Exp.Med.184:981-992)。在体外，它抑制内皮细胞形成管状结构(Angiolillo等，1995J.Exp.Med.182:155-162)。在体内，通过IL-2诱导IP-10导致中央肿瘤坏死并且周围血管显示出内膜增厚，内皮细胞凋亡，以及由血栓形成引起的血管腔得部分至完全阻塞((Angiolillo等，1996同上；Dias等，1998Int.J.Cancer 75:151-157)。已显示，IL12还通过其作为VEGF和基质金属蛋白酶(MMP)产生的调控物的作用而发挥抗血管生成作用(Dias等，1998Int.J.Cancer 78:361-365)。