[发明专利]用于增强生育力的剂和方法

说明书

公开了一种能够促进粒层细胞的增殖和分化的剂，所述剂包含生长和分化因子‑9(GDF9)蛋白，所述蛋白包含包括至少一个使与活化素样激酶4和/或5受体(ALK4/5)的结合和/或活化素样激酶4和/或5受体(ALK4/5)的活化增强的氨基酸取代的经修饰GDF9多肽单体。所述剂优选以成熟二聚形式(例如包含同一经修饰GDF9多肽单体的两个单体)和/或以原/成熟复合物形式提供。所述剂可尤其适于在体外促进卵母细胞成熟以用于辅助生殖技术中。

技术领域

本公开涉及生育力领域以及用于治疗不育的方法。特别地，本公开涉及可尤其适于在体外促进卵母细胞成熟的新型剂和方法。

优先权文件

本申请要求2018年5月9日提交的题为“Agent and method for enhancingfertility(用于增强生育力的剂和方法)”的澳大利亚临时专利申请第2018901579号的优先权，所述澳大利亚临时专利申请的内容据此通过引用以它的整体并入本文。

背景技术

女性不孕的原因是众多的，但主要广泛涉及排卵障碍、对输卵管的损害(输卵管性不孕)以及子宫或子宫颈原因诸如子宫内膜异位。

已估计排卵障碍是约25％的不育夫妇的不育原因(参见Fertility:Assessmentand Treatment for People with Fertility Problems,Royal College ofObstetriciansGynaecologists(London),2013年2月)。排卵障碍的特征在于很少发生排卵或不排卵，通常起因于卵泡生成不良或不完全，以致不达成或仅偶尔达成卵母细胞从卵巢的成熟卵泡排出(即排卵)。常见原因包括多囊卵巢综合征(PCOS)和下丘脑功能异常，这两者均与来自下丘脑和垂体腺的刺激排卵的生殖激素(即卵泡刺激激素(FSH)和黄体生成激素(LH))的调控异常的相关。然而，此外，还已知卵母细胞自身通过产生两种关键卵母细胞源性生长因子即生长和分化因子-9(GDF9)和骨形态发生蛋白-15(BMP-15)来在调控和促进卵泡生长方面，以及由此在它自身的发育方面起重要作用。均属于TGF-β超家族的这两种生长因子似乎主要作用于支持性粒层细胞(其中它们导致细胞增殖和分化成在卵泡发育和卵母细胞成熟的协调方面具有作用的卵丘细胞(Fauser等人2010))，然而，它们在卵巢功能，并且特别是卵泡生成方面的确切作用还有待于完全阐明。然而，至少在女性中，认为GDF9与BMP15两者均为正常卵巢功能所必需，因为已在患有原发性卵巢功能不全(POI)的女性中发现它们的相应基因的杂合性突变(Di Pasquale等人2004；Patino等人2017；Dixit等人2005)，由此使这些生长因子的异常水平与所述障碍和不良卵泡生成相关联。

对GDF9和BMP15的作用的其他研究已尤其发现：

(i)在女性中，hGDF9独自是潜活的(即非活性的)，而在小鼠中，已发现mGDF9能够以剂量依赖性方式诱导Sma和Mad相关蛋白(Smad)-2/3信号传导(Simpson等人2012)；

(ii)当用单独羊GDF9(oGDF9)处理粒层细胞时，不存在明显生物作用，但当用羊BMP15(oBMP15)共同处理时，粒层细胞增殖并分化(McNatty等人2005)，并且这些作用似乎由Smad-2/3信号传导介导，因为通过使用ALK4/5/7激酶抑制剂，它们受到阻断(McIntosh等人2008)；

(iii)hBMP15能够以剂量依赖性方式通过ALK6活化来诱导Smad-1/5/8信号传导(Al-Musawi等人2013)，但单独hBMP15处理不诱导与卵丘扩展或刺激粒层细胞增殖相关的基因的表达(Mottershead等人2015)；并且

(iv)用hGDF9:hBMP15异二聚体处理粒层细胞导致卵丘扩展相关基因的表达的显著增加，此可用ALK4/5/7抑制剂阻断，并且基本上不受ALK2/3/6抑制剂的存在的影响(Peng等人2013)。