[发明专利]用于分离心肌细胞群的方法在审
申请号: | 201980045945.6 | 申请日: | 2019-07-16 |
公开(公告)号: | CN112424340A | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
发明(设计)人: | 苏文昇 | 申请(专利权)人: | 新加坡科技研究局 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;G01N33/68;A61K35/34;A61P9/00 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 李珊珊 |
地址: | 新加坡*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 分离 心肌 细胞 方法 | ||
1.一种用于从样品中的异质分化细胞群中分离心肌细胞群的方法,该方法包括:
(a)使样品与至少一种试剂接触,该试剂与至少一种心肌细胞细胞表面标记物特异性结合;以及
(b)分离与所述试剂结合的细胞,其中心肌细胞细胞表面标记物选自表1。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法还包括通过使样品与第一试剂接触以提供第一心室心肌细胞群以及与第二试剂接触以提供第二心房心肌细胞群,在样品中分化心肌细胞亚型,所述第一试剂与选自表1的行A的细胞表面标记物特异性结合,所述第二试剂与选自表1的行B的细胞表面标记物特异性结合。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述第一试剂和所述第二试剂是相同的。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法还包括以下步骤:在分离心肌细胞群之前,产生样品的培养物并引起样品中细胞的分化。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中结合剂是抗体或其片段。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述抗体用可检测部分标记。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述可检测部分选自:荧光部分、发光部分、化学发光部分、放射性部分、酶促部分和第二抗体。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中分离的细胞包括具有至少约85%纯度的细胞群。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中使用荧光激活细胞分选法分离心肌细胞群。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中样品中的细胞包括从人多能干细胞分化的心肌细胞。
11.根据权利要求10所述的方法,其中所述细胞是ES03细胞和/或BJ iPS细胞。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述样品是异质分化干细胞群。
13.一种用于检测异质心肌细胞样品群中的心肌细胞的方法,该方法包括:
(a)使样品与至少一种结合剂在足以使结合剂去结合的条件下接触一段时间,该结合剂与至少一种心肌细胞表面标记物特异性结合,所述心肌细胞表面标记物选自表1;以及
(b)分离与结合剂结合的细胞,
其中结合剂结合的细胞是心肌细胞。
14.根据权利要求13所述的方法,其中通过免疫组织化学来检测心肌细胞。
15.根据权利要求13或14中任一项所述的方法,其中所述样品是包括心肌细胞的混合细胞群。
16.一种分离的心肌细胞群,其通过根据权利要求1至12中任一项所述的方法分离。
17.根据权利要求16所述的分离的心肌细胞群,其中至少85%的细胞是心肌细胞。
18.用于医学的、根据权利要求16或17中任一项的分离的心肌细胞群。
19.用于预防、修复和/或治疗受试者的至少一种心脏病症的、根据权利要求16或17中任一项的分离的心肌细胞群。
20.一种药物组合物,包括治疗有效量的根据权利要求16或17中任一项所述的细胞群以及药学上可接受的载体。
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