[发明专利]用于减轻抗药物抗体（ADA）免疫测定中的药物靶标干扰的方法

说明书

本公开提供了用于减轻抗药物抗体(ADA)免疫测定中的药物靶标干扰的方法，其中所述ADA免疫测定包括在温和的碱性pH测定条件下的一种或多种靶标阻断试剂。

对相关申请的引用

本申请要求于2018年7月10日提交的序列号为62/696,016的美国临时申请的优先权。前述申请的全部内容通过引用并入本文。

背景技术

在临床实践中，生物治疗剂(例如蛋白质、肽、核苷酸等生物制剂) 已被证明非常成功。然而，生物治疗剂，甚至全人治疗性单克隆抗体，都有产生抗药物抗体(ADA)的可能性，这些抗体可引起不希望的效应，如药物暴露的丧失、功效的丧失和严重的不良事件等(Koren,E.等人, 《当前药物生物技术(Curr Pharm Biotechnol)》,2002,3(4):第349-60页； Schellekens,H.,《临床治疗学(Clin Ther)》,2002,24(11):第1720-40页)。因此，免疫原性评估是生物治疗药物安全性测试的重要组成部分，针对药物开发各个阶段的免疫原性测试提出了一些建议，包含来自监管机构的建议(Shankar、G.等人,《药物和生物医学分析杂志(J Pharm Biomed Anal)》,2008,48(5):第1267-81页；Shankar,G.等人,《自然生物技术 (Nat Biotechnol)》,2007,25(5):第555-61页；Mire-Sluis,A.R.等人,《免疫学方法杂志(J Immunol Methods)》,2004,289(1-2):第1-16页； Swanson,S.J.和J.Bussiere,《微生物学最新观点(Curr Opin Microbiol)》, 2012,15(3):第337-47页；欧洲药品管理局(European Medicines Agency), C.f.M.P.f.H.U,《生物技术驱动的治疗性蛋白质免疫原性评估指南 (Guideline on Immunogenicity Assessment of Biotechnology-DrivedTherapeutic Proteins)》,欧洲药品管理局,伦敦,英国,2007；以及美国卫生和公众服务部(U.F.C.),CBER,《行业指南—治疗性蛋白质免疫原性测试的测定开发(草案)(Guidancefor Industry--Assay Development for Immunogenicity Testing of TherapeuticProteins(Draft))》,美国卫生与公众服务部,华盛顿州哥伦比亚特区,美国,2009)。

发明内容

本发明涉及用于减轻用于测定血清样品中针对药物的抗体(ADA) 的存在的ADA桥接免疫测定中的药物靶标干扰的方法。本方法包括：使所述血清样品与以下接触：用第一标记标记的捕获药物；用第二标记标记的检测药物；以及药物靶标阻断试剂。所述接触步骤之后是温育所述捕获药物、所述检测药物和所述药物靶标阻断试剂，使所述药物靶标阻断试剂与所述样品中存在的药物靶标相互作用，由此减轻所述ADA 桥接免疫测定中的所述药物靶标的所述干扰。随后执行抗药物抗体 (ADA)桥接免疫测定。

在本发明的一个方面，所述血清样品是人血清样品，在特定方面，所述样品来自正在用所述药物治疗的受试者。

在另一个方面，所述药物靶标阻断试剂是结合分子(例如抗体)。在一个实施例中，在所述结合分子是抗体的情况下，其可以包括人恒定区。可替代地，在另一个实施例中，所述药物靶标阻断抗体包括小鼠恒定区。

在一个方面，温育步骤在室温下进行。在另一个方面，温育在温和的碱性pH条件下进行。

在一个方面，本发明的药物是用于治疗人类的治疗性蛋白质，例如治疗性结合分子(如单克隆抗体(例如，全人类单克隆抗体))或治疗性融合蛋白质(如融合到免疫球蛋白Fc结构域(例如，设计用于治疗人类的IgG1 Fc结构域)的受体蛋白质)。在一个特定方面，所述药物是治疗性人单克隆抗体。