[发明专利]在模拟体内条件下的治疗性蛋白质选择

权利要求书

1.一种在模拟体内条件下确定非特异性相互作用的影响的方法，所述方法包括：

使包含生物学相关分子拥挤剂和靶分子的溶液与生物传感器接触，其中所述生物传感器的表面包含特异性地结合所述靶分子的捕获分子；

使所述靶分子结合至所述捕获分子；以及

使用生物层干涉法测定结合至所述捕获分子的所述靶分子的量。

2.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括：

将结合至所述捕获分子的所述靶生物分子的量与对照阈值进行比较，所述对照阈值区分与所述分子拥挤剂具有吸引性非特异性相互作用的靶生物分子和与所述分子拥挤剂具有排斥性非特异性相互作用的靶生物分子。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述阈值是对理想溶液、稀溶液或半稀溶液的归一化的反应。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述生物学相关分子拥挤剂包括人血清白蛋白(HSA)、IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、IgA、α2-巨球蛋白、IgM、α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、α1-酸性糖蛋白、载脂蛋白A-1、载脂蛋白A-11，或者血液或血清样品中发现的任何其他蛋白质组分。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述分子拥挤剂以生理相关浓度存在。

6.如权利要求4所述的方法，其中所述分子拥挤剂以介于约1g/L与约100g/L之间的浓度存在。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，所述方法还包括测定在所述生物学相关分子拥挤剂的两种或更多种浓度下结合的量。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述生物学相关分子拥挤剂包括血清和/或血浆。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，所述方法还包括测定在两种或更多种pH值下结合的量，以确定结合的pH依赖性。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，所述方法还包括测定在两种或更多种盐浓度下结合的量，以确定结合的盐依赖性。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述靶分子包含抗体，并且所述捕获分子包含特异性地结合至所述抗体的抗原。

12.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述靶分子包含抗原，并且所述捕获分子包含特异性地结合至所述抗原的抗体。

13.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述靶分子包含受体或其配体结合片段，并且所述捕获分子包含特异性地结合至所述受体或其配体结合片段的配体。

14.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述靶分子包含配体，并且所述捕获分子包含特异性地结合至所述配体的受体或其配体结合片段。

15.如权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述捕获分子通过接头偶联至所述传感器的所述表面。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述接头包含生物素和链霉亲和素或亲和素。

17.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述靶分子包含抗体，并且所述捕获分子包含抗IgG Fc。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述抗IgG Fc是抗人IgG Fc。